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制备单克隆抗体的技术要点
作者:佚名 来源:生物秀 时间:2008-4-21

    1.交瘤技术的技术流程
    如图4-1所示。


    图4 杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本流程

    2. 技术要点
      1) 免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。
      2) 骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前,骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选,防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性(恢复HGPRT的活性的细胞不能在含8-AG的培养基中存活)。骨髓瘤细胞用10%小牛血清的培养液在细胞培养瓶中培养,融合前24h换液一次,使骨髓瘤细胞处于对数生长期。

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