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实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制
作者:未知 来源:生物秀 时间:2007-5-4


    8、脂肪染色剂
    苏丹Ⅲ染液
    取0.1克苏丹Ⅲ,溶于20毫升95%酒精中,即成0.5%苏丹Ⅲ染液。
    这染液能染脂肪,还能染木栓、角质层。
    9、血液染色剂
    配方一 瑞氏(Wright’s)染液
    取瑞氏染料粉末0.1克和甲醇60毫升。把染料放在研钵内,加少量甲醇研磨,使染料溶解,然后把溶解的染料倒入干净的棕色玻璃瓶。并用完甲醇为止。配制好的染液在室温中保存,即可使用。新鲜配制的染液偏碱性,放置后呈酸性,染液贮存愈久染色愈好。这染液的适宜pH值是6.4~6.8。因此,染色时加入缓冲液,可维持一定的酸碱度,使染色效果更好。
    这种染液除能染血液,还能染疟原虫。
    瑞氏染料可以自制。在100毫升0.5%碳酸氢钠水溶液里加入1克美蓝,溶解后放在锅内,蒸上1小时,取出冷却后过滤。在滤液里加入0.1%伊红水溶液500毫升,随加、随搅拌,使混合液呈紫色。静置一夜后,用滤纸过滤。滤纸上的沉淀物,在室内风干或放在干燥箱内,充分干燥后研磨成粉末,即成瑞氏染料。
    配方二 甲基紫染液
    取甲基紫0.5克,加到100毫升生理盐水中,溶解后加入冰醋酸0.02毫升。
    10、吸虫染色剂
    梅耶氏(Mayer’s )明矾—洋红染液
    取铵明矾(硫酸铝铵)5克,溶于95毫升蒸馏水中,再加入0.5克洋红酸,加热溶解,冷却后过滤。在滤液中加入少量防腐剂,如麝香草酚、樟脑粉、水杨酸钠、苯酚(石炭酸)等,以防生霉。
    这种染液适合于染小型动物材料,如吸虫等寄生虫的整体,也能染高等植物的表皮和蕨类植物的原叶体。
    11、活体染色剂
    配方一 中性红染液
    先配成1%中性红水溶液(1克中性红溶于100毫升蒸馏水中)。取这种溶液1毫升,用0.6%生理盐水(或蒸馏水)稀释到50毫升,即成0.02%中性红水溶液,贮存在棕色瓶里,放在黑暗处。
    本染液用来显示原生动物的食物泡以及动植物组织中活细胞的内含物等。
    配方二 尼罗蓝(Nile Blue)染液
    取0.1克尼罗蓝,溶解于1000~1500毫升蒸馏水中,即成尼罗蓝染液。
    这种染液能把原生动物大核染成绿色,食物泡染成蓝色。
    配方三 亚甲蓝染液
    取0.1克亚甲蓝,溶解于1000毫升蒸馏水中,即成亚甲蓝染液。
    这种染液用于原生动物的活体染色。
    12、透明骨骼标本染色剂
    配方一 茜素红染液(Ⅰ)
    取冰醋酸5毫升、甘油5毫升、1%水合氯醛60毫升混合。在这种混合液中方入少量茜素红,制成茜素红饱和溶液。
    配方二 茜素红溶液(Ⅱ)
    取1克茜素红,溶于100毫升95%酒精中,搅拌,然后跟900毫升1%氢氧化钾溶液相混,即成深紫色的茜素红染液。
    (七)固定液和保存液
    用固定液固定动植物整体或它的一部分组织和气管等,能保存组织内细胞的形态、结构及其组成,尽量使它近于生活状态。固定液一般有防腐和保存的作用,分为单纯固定液和混合固定液。单纯固定液中最重要的有乙醇、福尔马林、醋酸、苦味酸、铬酸、重铬酸钾、升汞等,前两种固定液是中学生物实验室常用的。单纯固定液的优点是简便,缺点是有一定的局限性,不易达到理想的固定要求。混合固定液有几种不同的药液按一定的比例混合而成,使各自的优缺点相互补充,成为较完美的固定液。这种固定液的制备虽比较麻烦,但是效果比较好。常用的混合固定液是醋酸—酒精混合液、福尔马林—醋酸—酒精液、包因氏固定液等。
    常用的保存液大致跟固定液相同,主要是福尔马林、酒精、甘油以及由这些药物按比例配制成的各种混合液。有时按特殊保存的需要,再保存液中增加某些药品(如原生标本的保存液)。
    1、福尔马林
    福尔马林在固定组织标本时杀菌能力强,所以防腐性强,渗透力大,固定得快。永福尔马林固定精细的解剖标本时,要跟甘油、酒精、石炭酸等混合使用。
    固定液常用的浓度是5~10%(根据材料的大小、性质和数量而定)。
    保存液常用的浓度是5~10%。用福尔马林作保存液,效果好且价格低廉。
    在配制福尔马林溶液(固定液或保存液)时,应将37~40%的甲醛作为整个溶质来配。例如配制5%福尔马林是取市售37~40%甲醛溶液5毫升跟95毫升蒸馏水混合。实际上甲醛含量只有1.9~2%,这样的配法已成为一般实验室常用的惯例。
    注意事项:
    (1)福尔马林业在长期贮存中会产生蚁酸,可适量的加入碳酸钙( )或碳酸镁( )等碱性物质进行中和。
    (2)福尔马林业作为保存液会慢慢挥发而致使浓度降低,并且福尔马林液再保存中往往形成多聚甲醛,使浸液变浊,影响观察。所以,根据一定保存期的情况,可适当增加福尔马林液的浓度或更换新液,以防标本变坏。其中如有白色沉淀物,加热后可使它溶解。
    (3)市售的福尔马林液常带有酸性,能腐蚀石灰质,因此,最好不用福尔马林液浸制有石灰质外壳的动物。

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