2.2.1固定的意义
新鲜的组织被割取后,由于细胞内酶的作用和细菌的繁殖，可引起组织的自溶和腐败。因此，割取组织块后，应立即采用一 种方法．将组织尽可能保持原有的形态结构，且有利于保存和适于制片的操作，这一步骤称为固定。
固定的目的和作用在于：
①防止组织自溶和腐败；
②使细胞内的蛋白质、糖、脂肪等各种成分沉淀保存下来从而保存细胞的各种组成成分使其保持与生活时相近似的形态和结构；
③因沉淀及凝固的关系，使细胞内不同的成分产生不同的折光率，造成光学上的差别使原来在生活情况下看不清楚的结构变得清晰易见，且有的固定剂还有助染作用(如醋酸、苦味酸)，从而使细胞各部易于染色；
④固定剂还兼有硬化作用，使柔软组织硬化而不易变形，有利于操作。
2.2.2固定的方法
固定有物理方法和化学方法两种。
物理方法固定有干燥、高热和低温骡冷等。例如，血液涂片就是干燥固定；细菌涂片可用加热法固定；许多组织化学反应的制片是以低温骡冷固定作冰冻切片的。
化学方法固定就是用化学试剂配制成固定液使之固定。
2.2.3固定液的选择
固定液的种类很多。可分为两大类：简单固定液和混合固定液。
简单固定液又称单纯固定液，就是用一种化学试剂作为固定液，如乙醇、甲醛溶液、冰醋酸等,它们只是对细胞的某种成分固定得较好；不能将细胞所有的成分都保存下来。如升汞固定蛋白质、冰醋酸固定核蛋白、无水乙醇可固定糖原等，单纯固定液是有局限性的。
混合固定液就是用几种化学药品，按一定的比例混合配制而成的，由于各种药品的优缺点互相弥补，因此可产生较好的效果。
2.2.4常用的固定液
福尔马林—醋酸—酒精混合固定液（FAA液）
是植物制片技术中较为良好的固定液和保存液。除单细胞和丝状藻类外，均可用此液固定．也通用于昆虫和甲壳类的固定。
FAA液配方：
福尔马林 5m1
冰醋酸 5m1
50％或70％酒精 90m1
Bouin氏液
是常用的良好固定液，广泛应用于一般动物组织、昆虫组织、无脊椎动物的卵和幼虫，以及胚胎学材料的固定。也适用于裸子植物的雌配子体和被子植物的胚囊的固定。
Bouin氏液配方：
苦味酸饱和水溶液 75份
福尔马林 25份
冰醋酸 5份
此液穿透迅速而均匀，使组织收缩少，不使组织变硬变脆，着色良好。一般动物组织固定12—24h，小块组织数小时即可。固定后直接入70％酒精中洗去黄色，但留一点黄色对染色并无妨碍。植物材料的固定时间为12—48h。
2.2.5固定的注意事项
(1)固定的材料越新鲜越好。因此，采集或割取后须立即投入预先准备好的固定液中进行固定，切勿耽误。
(2)材料大小以直径不超过5mm为宜，材料与固定液的比例为 1:20。
(3)根据材料的性质和制片的目的选择固定液。
(4)所固定的植物材料，若表面有毛茸或其它不易穿透的物质，则可用含有酒精的固定液固定。
(5)含有气泡的材料投入团定液后，材料不会下沉，故须将气泡抽出使材料下沉。最简易的抽气方法是将材料和固定液一并例入10ml的注射器中，抽动几次。也小用抽气装置进行抽气。
(6)固定时，要防止材料变形。
(7)外有被膜，而内部站构又极易松散的器官，应将整个器官投入固定液2—2h后，再将其修成小块材料继续则定。
(8)含行粘液、污物或血液的材料需用生理盐水洗净后．再行固定。
(9)材料投入固定液后．须经常摇晃。
(10) 容器外需贴标签。
