6）无Ca Mg 离子PBS；
用途：A）配制EDTA、胰酶、胶原酶；
       B）冲洗血管；
配制：500ML
称量：NaCL             4 g                KCL        0.1 g
      Na₂HPO₄.12H₂O 1.445 g                 KH₂PO₄     0.1 g
注意：在400ML水中依次溶解上述试剂；加入1%酚红1ML，然后加水至500ML。
消毒：10分钟10磅高压灭菌；
保存：4度。
使用：用时以5.6%NaCO₃调PH至7.2左右，但用于配制胰酶、EDTA、胶原酶时，不调PH。
7）胰蛋白酶；
浓度： 0.25%
用途：A）原代消化：将细胞从血管上消化下来。
       B）传代消化：将细胞从培养瓶上消化下来。
       C）消化丢弃细胞：清除培养瓶上残余细胞。
配制： 100ML
称量：胰酶0.25 g。
注意：用90ML无Ca、Mg、离子PBS、溶解胰酶，再加该PBS至100ML（胰酶溶解较难，必
      要时在4度过夜以便溶解）。
消毒：10磅10分钟高压灭菌。
保存：小分装于-20度保存。
使用：用时调PH7.2左右，用5.6%NaCO₃调。
      原代消化用0.25%浓度；传代用0.25%胰酶与0.04%EDTA对半混合。
8）  EDTA Na盐；
浓度： 0.1%
配制：100ML；
称量：EDTA        0.04g
注意：用90ML无Ca、MG离子PBS溶解EDTA，后加该PBS至100ML
消毒：10磅10分钟高压灭菌。
保存：小分装于-20度保存。
9）   胶原酶；
浓度：0.1%；
用途：用于原代消化细胞；
配制：100ML；
称量：胶原酶        0.1 g;
注意：用90ML无Ca、Mg、离子PBS（或HaNK`S、无血清M199）溶解胶原酶，后加液至 
      100ML。
消毒：过滤除菌；
保存：小分装于-20度保存。
10） M199培养液；
配制：500ML；
称量：M199粉        5 g;
注意：以水400ML溶解M199，以NaHCO₃（粉剂）调PH至7左右，再加水至500ML。
消毒：过滤除菌；
保存：4度或-20度保存；（4度保存不超过30天；-20度保存不超过100天。）
11）  0.25%柠檬酸胰酶；
用途：用于HUVEC传代培养；
配制：1000ML；
称量：胰酶2.5g、柠檬酸钠2.96；
注意：以PBS溶解，调PH6.9--7.2;
消毒：过渡灭菌；
保存：-20度保存。
12）培养用CO₂浓度；
干燥罐：188平方厘米；
磷酸：5%……4000ML水+134ML85%磷酸；
NaHCO₃:          0.7g;
5%磷酸30ML+0.7gNaHCO₃，混均便产生5%CO₂。

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