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实时荧光定量PCR(real-time PCR)
作者:赵燕燕 来源:陕西师范大学 时间:2007-12-20

    Threshold Cycle, CT
     Correlates strongly with the starting copy number
     Is linear with the log of starting copy number

    Practice with the animation so you understand the timing of this slide (if you haven’t used it before) - ask the audience to participate in this, it is a good way for you to determine the different comfort levels your audience has with the Ct concept.
    See next slide for relationship between dilution series and threshold cycle values.

    Ct值与模板起始浓度的关系
    -模板起始浓度越高,Ct值越小
    -Ct值与模板起始拷贝数的对数存在线性关系
    如果模板浓度增加1倍,Ct值就提前1个循环到达
    如果模板浓度减少1倍,Ct值就滞后1个循环到达

    Mathematic Implications
    Ideal PCR

    1 CT Difference = 2 fold difference in starting template amount
    3.3 CT Difference = 10 fold difference in starting template amount
    Further elaboration on the exponential nature of PCR.  The mathematic expression that describes the process is shown.  Some basic implications are listed.

    绝对定量可以得到某个样本中基因的拷贝数和浓度

    Plot of Ct versus copy number.
    Note the Dynamic Range of 101 to 1010.

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