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聚合酶链式反应 ( PCR) 可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增 。在扩增反应结束之后，我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析，也可以通过 放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析 。无论定性还是定量分析，分析的都是 PCR 终产物。但是在许多情况下，我们所感兴趣的是未经 PCR 信号放大之前的起始模板量。例如我们想知道某一转基因动植物转基因的拷贝数或者某一特定基因在特定组织中的表达量。在这种需求下荧光定量 PCR 技术应运而生。
实时定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，使每一个循环变得“可见”，最后通过Ct值和标准曲线对样品中的DNA (or cDNA) 的起始浓度进行定量的方法。
实时荧光定量 PCR是目前确定样品中DNA (或 cDNA) 拷贝数最敏感、最准确的方法。
Real-Time PCR and Conventional PCR
常规 PCR Process
In theory, product accumulation is proportional to 2n, where n is the number of amplification cycle repeats
Reality vs. Theory
Amplification is exponential, but the exponential increase is limited:
-A linear increase follows exponential
-Eventually plateaus
常规PCR方法的局限性分析：
-无法对起始模板准确定量,只能对终产物进行分析
-必须在扩增后用电泳方法分析,费时费力而且EB有毒
-无法对扩增反应实时检测
定量的最佳时期
Quantitative information comes from monitoring
the early stages of amplification
