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石蜡切片技术实验
作者:佚名 来源:河北大学细胞生物学实验室 时间:2007-12-16

    四、染色
    1 脱蜡 二甲苯(2)→二甲苯(1),每步510min;
    2 复水 1/2乙醇+1/2二甲苯→100%乙醇(2)→ 100%乙醇(1)→ 85%乙醇→ 70%乙醇→ 50%乙醇→ 30%乙醇→
    蒸馏水,每步2min;
    3 初染 代氏苏木精染色15min;
    4 分化 0.1%HCl脱色至变红→0.1%NaOH至变蓝;
    5 脱水 蒸馏水(3-5s)→ 30%乙醇→ 50%乙醇→70%乙醇→ 85%乙醇,每步2min;
    6 复染 0.5%伊红(溶于95%乙醇)染色10~15min;
    7 脱水透明95%乙醇(1020s)→100%乙醇(1) →100%乙醇(2)→ 1/2乙醇+1/2二甲苯→二甲苯(1) →二甲苯(2)(≥3min),每步2~3min;
    8 封片 将材料周围擦干净(注意在擦的过程中材料上的二甲苯必须保证不能干,可随时补加),加1~2滴中性树胶,加盖玻片(需提前洗净擦干备用);
    9 贴标签 注明样品名称、染色方法、组号、姓名和日期;
    10 镜检 检查样品取材、切片及染色情况,熟悉样品为下次样品观察做好准备;
    11 干燥 平放于展片盘中,于37℃温箱中或自然干燥;
    12 预习 下次实验:样品的观察,需提前做好预习,并准备纸、铅笔。

    五、观察
    1 样品观察
    • 小白鼠脑;
    • 小白鼠心肌;
    • 小白鼠肝脏;
    • 小白鼠肾脏;
    • 小白鼠肺;
    • 小白鼠小肠;
    • 小白鼠肌肉;
    • 小白鼠精巢;
    • 小白鼠卵巢等。
    2 绘图
    • 任选一种样品将结构完整地绘于实验报告上。
    3 样品结构显微照片如下:

     

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