8 指导预后和治疗
免疫组化标记中与预后有关的标记大致可分为三类：①类固醇激素受体：如雌激素受体、孕激素受体等，它们与乳腺癌的关系已获公认，性激素受体阳性者内分泌治疗效果较好，预后也较好。相似的结果也见于子宫内膜癌和卵巢癌。②肿瘤基因标记：如癌基因c-erB-2，c-myc，P53蛋白等，在肿瘤中高度表达者，患者预后较差；而nm23蛋白高度表达者，肿瘤转移率较低，预后较好。③细胞增殖性标记：如表皮生长因子受体（EGFR）、增殖细胞核抗原（PCNA）、Ki-67等，表达指数越高，表明其增殖越活跃，恶性度增高，预后不良，其中以恶性淋巴瘤、乳腺癌较为明显。而且在乳腺癌的研究中发现Ki-67、 PCNA 、EGFR阳性者，淋巴结转移率高，并与激素受体的表达呈负相关。
9 辅助疾病诊断和分类
人体的免疫性疾病，主要是自身免疫性疾病，如肾小球肾炎、皮肤自身免疫性疾病等，可用免疫组化方法对组织细胞内的免疫球蛋白、补体、免疫复合物等进行检测以辅助诊断。某些疾病的分类或分型也是在免疫组化基础上建立的。内分泌肿瘤如垂体前叶腺瘤，根据其分泌功能可分为生长激素腺瘤、泌乳激素腺瘤等10型；胰岛细胞瘤的功能分类为胰岛素瘤、高血糖素瘤等6种；恶性淋巴瘤根据瘤细胞表面标志不同可分为T细胞性、B细胞性。肾小球肾炎的免疫学分类亦需免疫组化或免疫荧光技术。
10 寻找感染病因
人体疾病的致病微生物中有的在常规病理检查中不易发现，尤其是病毒性致病微生物，由于其分子水平的结构，在细胞水平上难以发现，通过免疫组化方法则可明确发现病原体抗原部位以及定量，如巨细胞病毒（CMV）、人乳头状瘤病毒（HPV）、单纯疱疹病毒（HSV）、乙型肝炎病毒（HBV）等，已有商品化标志物帮助解决病因诊断问题。
二、免疫组织化学技术细节处理总论
（一）标本的处理——细节注意
标本的处理是良好免疫细胞组织化学结果的前提，必须保证要检测的细胞或组织取材新鲜，固定及时，形态保存良好，抗原物质的抗原不丢失，不扩散或被破坏。标本的处理过程中应该注意以下两个方面：取材、固定。
1 取材
细胞标本取材可有印片法、穿刺吸取涂片法、体积沉淀涂片法、培养细胞标本取材及离心涂片机法。
1.1 印片法
主要应用于活检组织标本和手术切除标本。新鲜标本以最大面积剖开，充分暴露病变区，将载玻片轻轻压于病变区，脱落细胞便粘附于玻片上，立即浸入细胞固定液内5~10分钟，取出后自然干燥，低温保存备用。
1.2 穿刺吸取涂片法
主要应用于实质器官的病变区，如肝、肾、肺、淋巴结、软组织等。用细胞针穿刺吸取病变区内液体成分，可直接涂抹在玻片上，力求细胞分布均匀。如穿刺液较多，细胞丰富，可用洗涤法，即将穿刺液滴入盛有1~2ml Hank（或RPMI-1640）液的试管内，轻轻搅拌，以500r/min低速离心5~10min后，弃上清液，将沉淀制成细胞悬液（1×106细胞/ml），吸取1滴于载玻片上，轻轻涂抹或用离心涂片机制成涂片，待涂片略干即可固定。(生物秀实验频道 www.bbioo.com)
1.3 体积沉淀涂片法
主要用于胸水、腹水、尿液、脑脊液等体液多细胞少的标本。体液采取后，必须及时处理，不宜加固定剂。根据标本内细胞数量多少选用不同的处理方法：①细胞数量极多者，可吸取少量液体直接涂在玻片上；②细胞数量少者，可将液体沉淀，然后取沉淀液以1500r/min离心10min，弃上清，将细胞涂片或用离心涂片制成涂片，略干后固定备用。
1.4 培养细胞标本取材
根据培养细胞特性分别采用不同的方法。对某些贴壁生长的细胞，只需将载玻片插入培养瓶内即可制备理想的细胞标本。而对于浮悬培养的细胞，可用离心涂片机制成涂片。
1.5 离心涂片机法
将待涂片的细胞样品成2×105~6/ml的细胞悬液，吸取50～100μl加入涂片机内，1000r/min离心2min后细胞就均匀地分布于玻片上。
制备细胞涂片应注意：①标本反复离心洗涤后，细胞黏附性降低，在免疫染色过程中易脱落，因此，在制片前载玻片上应涂黏附剂；②为节省试剂和便于观察，应将细胞集中在0.6~1cm2的圆圈内，细胞总数以105个为宜；③黏液丰富的标本，如痰液、胃液，未经特殊处理，一般不宜作免疫组织化学染色。
组织标本的取材常受各种因素的影响，应注意：①活检钳的刃口必须锋利，以免组织受挤压；②取材部位主要是病变区，但必须取病灶与正常组织交界区；③必要时取远距病灶区的正常组织作对照；④为充分保存组织的抗原性，标本离体后应立即处理或速冻进行冷冻切片，或立即用固定液固定，进行脱水、浸蜡、包埋。如不用迅速制片，也可贮于液氮或-70℃保存。
2 固定
固定在整个免疫组织化学技术中是关键所在。首先，通过固定可使细胞内蛋白质凝固，防止细胞内酶反应过程，防止细胞自溶，保持细胞固有形态和结构；其次，通过固定可以保存组织细胞的抗原性。固定不足，抗原会丢失；固定过度，则抗原性质改变或抗原成分被遮蔽。
