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生化实验的基本操作
作者:佚名 来源:生物秀 时间:2007-11-18

    2.注意事项:
    (1)使用前应检查电源(电压、电流)是否符合规定,地线是否接妥。
    (2)挥发性物品,如盛有有机溶剂的器皿,不能放入,以防火灾和爆炸。
    (3)安放物品时,应小心,不要触及自动恒温控制器的窗筒和温度计,以免损坏部件。安放物品后应立即关好箱门,以便保持温度恒定。
    (4)烘烤洗刷完的仪器时,应尽量将水珠甩去再放人烘箱内。干燥后,待温度降至60℃以下方可取出物品。注意,若温度超过 180℃,箱内棉花或纸张则烤焦,玻璃器皿则易破损。
    (5)电热鼓风干燥箱的电动机轴承,每年至少加润滑油一次。
    (6)仪器必须有良好地线.(生物秀实验频道——专业专注! www.bbioo.com
    (7)仪器附近不能放置易燃物品。’
    (8)检修时不能带电操作。

    (四)电动离心机
    在实验过程中,欲使沉淀与母液分开,有过滤和离心两种方法。在下述情况下,使用离心方法较为合适。
    (1)沉淀有粘性。
    (2)沉淀颗粒小,容易透过滤纸。
    (3)沉淀量过多而疏松。
    (4)沉淀量很少,需要定量测定。
    (5)母液粘调。
    (6)母液量很少,分离时应减少损失。。
    (7)沉淀和母液必须迅速分离开。
    (8)一般肢体溶液。
    离心机是利用离心力对混合溶液进行分离和沉淀的一种专用仪器。电动离心机通常分为大、中、小三种类型。在此只介绍生物化学实验室使用的小型台式或落地式电动离心机。
    1.操作:
    (1) 使用前应先检查变速旋钮是否在“0”处。外套管应完整不漏,外套管底部需放有橡皮垫。
    (2) 离心时先将待离心的物质转移到大小合适的离心管内,盛量不宜过多(占管的2/3体积),以免溢出。将此离心管放入外套管,再在离心管与外套管间加入缓冲用水。
    (3) 一对外套管(连同离心管)放在台称上平衡,如不平衡,可调整离心管内容物的量或缓冲用水的量。每次离心操作,都必须严格遵守平衡的要求,否则将会损坏离心机部件,甚至造成严重事故,应该十分警惕。
    (4) 将以上两个平衡好的套管,按对称方向放到离心机中,盖严离心机盖,并把不用的离心套管取出。
    (5)开动时,先开电门,然后慢慢拨动旋钮,使速度逐渐增加。停止时,先将旋钮拨动到“0”,不继续使用时拔下插头,待离心机自动停止后,才能打开离心机盖并取出样品,绝对不能用手阻止离心机转动。
    (6)用完后,将套管中的橡皮垫洗净,保管好。冲洗外套管,倒立放置使其干燥。
    2.注意事项:
    (1)离心过程中,若听到特殊响声,表明离心管可能破碎,应立即停止离心。如果管已破碎,将玻璃渣冲洗干净(玻璃渣不能倒入下水道),然后换新管按上述操作重新离心。若管来破碎,也需要重新平衡后再离心。
    (2)有机溶剂和酚等会腐蚀塑料套管,盐溶液会腐蚀金属套管。若有渗漏现象,必须及时擦洗干净漏出的溶液,并更换套管。
    (3)避免连续使用时间过长。一般大离心机用40分钟休息20或30分钟,台式小离心机用40分钟休息10分钟。
    (4)电源电压应与离心机所需要的电压一致。接地线后,才能通电使用。
    (5)一年应检查一次离心机内电动机的电刷与整流子磨损情况,严重时更换电刷或轴承。

    (五)分光光度计
    根据物质的吸收光谱进行定性或定量分析的方法称为吸收光谱法,或分光光度法。该法所用的仪器称为分光光度计,或吸收光谱仪。如:用于可见光及紫外光区域的吸收光谱仪,通常叫做分光光度计;用于红外光区域的吸收光谱仪,简称为红外光谱仪。
    分光光度计的工作原理与光电比色计相似,两者的主要区别在于:首先,分光光度计的单色光器(通过棱镜或光栅)比滤光片所选择的波长范围要小的多。前者为3—5毫微米,是较纯的单色光,而后者为30—50毫微米。其次,分光光度计不仅能在可见光区域内测定有色物质的吸收光谱,而且也能在紫外及红外光区域测定无色物质的吸收光谱。多数情况下,样品不需要显色就能进行定性和定量分析。另外,微电流检流计也比较精密。如:581-G型的灵敏度为0.5×10-8安培/格, 72型分光光度计为 1.4—2.0×10-9安培/格。分光光度计还增加了稳压装置。因此,分光光度法优越于光电比色法。在此着重介绍国产72型分光光度计和751型分光光度计的使用。

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