3.为什么培养基中可以省去酚红?
酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂,研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素),为避免固醇类反应,用无酚红培养基。
4.在新鲜培养基中添加了血清和抗生素后,有效期是多长?
一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。
5.为什么不要用碳酸氢钠调pH值?
如图所示,培养基pH值随着碳酸氢钠量的增加,呈抛物线增长,当碳酸氢钠加到一定量时,pH变化越来越小。而培养基的渗透压值随着碳酸氢钠量的增加,呈直线增长,碳酸氢钠量越大,渗透压值越大。
如果为了达到工作pH值仅加入少量的碳酸氢钠,而忽略渗透压,一来可能会达不到缓冲效果而引起细胞培养过程中pH值变化较剧烈,二来会使培养基成为低渗溶液,在培养细胞时易造成细胞膨胀破裂;如果为了达到工作pH值而加入大量碳酸氢钠,一来可能会难以达到期望的pH值,二来会使培养基成为高渗溶液,在培养细胞时易造成细胞萎缩。
生产中最好通过实验找到合适渗透压和pH值情况下的碳酸氢钠加入量。下面是DMEM(HED)和MEM培养基的碳酸氢钠与pH值、渗透压的曲线。
(1) DMEM(HED)培养基

(2)MEM培养基



