2 结果
2. 1 豚鼠耳蜗微血管内皮细胞的生长与形态
耳蜗血管纹微小组织块接种后2 d ,可见部分组织块边缘有细胞长出,之后细胞数量逐渐增多,见图1 ,接种后10 d 左右,这些组织块周围已可见由成片细胞组成的细胞集落。倒置显微镜下,单个的培养细胞大多呈长梭形,少数为三角形或多边形,胞体大且折光性强。细胞传代后约8 d ,经过大量增殖的培养细胞紧密排列,融合成片状单层,显微镜下形成内皮细胞培养时典型的“铺路石样”外观,见图2。传代细胞初种时为明亮的球形,悬浮于培养液中,18 min 左右大部分细胞已经贴壁,分布均匀,2 h 后细胞变大变长,12 h 细胞已完全展开,8 d 左右细胞已增殖融合成单层。
图1 血管纹组织块培养后5 d ,周围细胞向外生长 ( ×200)
Fig 1 A few cells grewaround the stria tissue nubble after
cultured for 5 days ( ×200)
图2 细胞接种后8 d ,单层内皮细胞呈“铺路石样”外观 ( ×500)
Fig 2 Eighth day after cells inoculation , the monolayer
cells appeared structure of“scree” ( ×500)
2. 2 免疫组化结果
用免疫组化S2P 法检查第Ⅷ因子相关抗原,95 %以上细胞的胞浆中有棕黄色着色,即呈阳性反应,见图3 ,而空白对照组与阴性对照组无此着色,更进一步证实为血管内皮细胞。
图3 纯化后的第4 代培养细胞,经免疫组化检测Ⅷ因子抗原,
胞质呈棕黄色阳性反应 (S2P ×500)
Fig 3 After purification , the fourth generation cultured cell showed
brownish yellow positive reaction of factor Ⅷrelative antigen
in cytoplasm by immohistochemistry (S2P ×500)
