溶解柠檬酸三钠(二水)和氯化钠于约0.9L水中,加几滴10N NaOH溶液调pH为7.0,用水补足体积至1L。
DEPC(焦碳酸二乙酯)处理水
加100ul DEPC 于 100ml 水中,使DEPC的体积分数为0.1%。在37℃温浴至少12h,然后在15 psi 条件下高压灭菌20min,以使残余的DEPC失活。DEPC会与胺起反应,不可用DEPC处理Tris缓冲液。
甲酰胺(deionized formamide)
直接购买或加Dowex XG8 混合树脂于装有甲酰胺的玻璃烧杯中,用磁力搅拌器轻轻搅拌1h,可去除甲酰胺中的离子。经Whatman 1号滤纸过滤除去树脂后分成小份,充氮气于-80℃贮存(防止氧化)。
磷酸缓冲液(phosphate buffer)
按照下表所给定的体积,混合1 mol/L 的磷酸二氢钠(单碱)和1mol/L 磷酸氢二钠(双碱)贮液,获得所需pH的磷酸缓冲液。配制1 mol/L 的磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)贮液:溶解138g于足量水中,使终体积为1L;1mol/L 磷酸氢二钠(Na2HPO4)贮液:溶解142g于足量水中使终体积为1L。
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1mol/L 磷酸二氢钠(ml) |
1mol/L 磷酸氢二钠(ml) |
最终pH值 |
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877 850 815 775 735 685 625 565 510 450 390 330 280 |
123 150 185 225 265 315 375 435 490 550 610 670 720 |
6.0 6.1 6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 6.7 6.8 6.9 7.0 7.1 7.2 |
TE(用于悬浮和贮存DNA)
| 成分及终浓度 | 配制100ml溶液各成分的用量 |
| 10mmol/L Tris-HCl 1mmol/L EDTA 水 |
1ml 1mol/L Tris-HCl(pH7.4-8.0,25℃) 200ul 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0) 98.8ml |
Tris缓冲液(Tris-HCl buffer)
将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中,再根据所要求的pH(25℃下)加一定量的浓盐酸(11.6N),用水调整终体积至1L。
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浓盐酸的体积(ml) |
pH |
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8.6 14 21 28.5 38 46 56 66 71.3 76 |
9.0 8.8 8.6 8.4 8.2 8.0 7.8 7.6 7.4 7.2 |
二.电泳缓冲液、染料和凝胶加样液
50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液
| 成分及终浓度 | 配制1L溶液各成分的用量 |
| 2mol/L Tris碱 1mol/L 乙酸 100 mmol/L EDTA 水 |
242g |
5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液
| 成分及终浓度 | 配制1L溶液各成分的用量 |
| 445 mmol/L Tris碱 445 mmol/L 硼酸盐 10 mmol/L EDTA 水 |
54g |


