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实验常用试剂的制备与储藏
作者:佚名 来源:生物秀 时间:2007-10-12

    2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):溶解36.4g山梨(糖)醇于足量水中使终体积为100ml。

    100%三氯乙酸(TCA):在装有500gTCA的试剂瓶中加入100ml水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。(稀释液应在临用前配制)

    2.5% X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷):溶解25mg的X-gal于1ml的二甲基甲酰胺(DMF),用铝箔包裹装液管,贮存于-20℃。

    100×Denhardt试剂(Denhardt's regent)

    成分及终浓度 配制100ml溶液各成分的用量
    2%聚蔗糖(Ficoll,400型)
    2%聚乙烯吡咯烷酮(PVP-40)
    2%BSA(组分V)

    2g
    2g
    2g
    加水至总体积为100ml

    依照上表称取各组分,溶于水中定容。过滤除菌及杂质,分装成小份于-20℃贮存。

    10×标准DNA连接酶缓冲液(standard DNA ligase buffer)(粘端、平端连接)

    成分及终浓度 配制10ml溶液各成分的用量
    0.5mol/L Tris-HCl
    100mmol/L MgCl2
    100mmol/L DTT
    2mmol/L ATP
    5mmol/L 盐酸亚精胺(可选)
    0.5mg/ml BSA(组分V)(可选)
    5ml 1mol/L 贮液
    1ml 1mol/L 贮液
    1ml 1mol/L 贮液
    200ul 100 mmol/L 贮液
    50ul 1 mmol/L 贮液
    0.5ml 10 mg/mL 贮液
    2.25ml


    将配制好的缓冲液分装成小份,贮存于-20℃ 。

    100 mmol/L dNTP 溶液(dNTP solutions)
    可以购买到100mmol/L纯dNTPs贮液,-80℃可贮存至少6个月。

    10mmol/L dNTP混合液

    成分及终浓度 配制20ul溶液各成分的用量
    10mmol/L dATP
    10mmol/L dCTP
    10mmol/L dGTP
    10mmol/L dTTP
    2ul 100 mmol/L dATP 贮液
    2ul 100 mmol/L dCTP 贮液
    2ul 100 mmol/L dGTP 贮液
    2ul 100 mmol/L dTTP 贮液
    12ul

    20%PEG 8000/2.5M NaCl

    成分及终浓度 配制10ml溶液各成分的用量
    质量浓度为20%聚乙二醇
    2.5mol/L 氯化钠
    20g
    50ml 5 mol/L 氯化钠 或 14.6g 固体氯化钠
    补足100ml


    加聚乙二醇于含有氯化钠的烧杯中,加水至终体积100ml,用磁力搅拌器搅拌溶解。

    20×SSC

    成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量
    300mmol/L 柠檬酸三钠(二水)
    3mol/L 氯化钠
    88.2g
    175.3g
    补足1L

     

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