附录:
1 营养琼脂
1.1 成分
蛋白胨 10g
牛肉膏 3g
氯化钠 5g
琼脂 15~20g
蒸馏水 1000mL
1.2 制法
将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.2~7.4。加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化。分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。
注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%
2乳糖发酵管
2.1 成分
蛋白胨 20g
乳糖 10g
0.04%溴甲酚紫水溶液 25mL
蒸馏水 1000mL
pH7.4
2.2 制法
将蛋白胨及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,按检验要求分装30mL、10mL或3mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min。
注:①双料乳糖发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。
②30mL和10mL乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用,3mL乳糖发酵管供大肠菌群证实 试验用。
3 氯化镁孔雀绿增菌液(MM)
3.1 甲液
胰蛋白胨 5g
氯化钠 8g
磷酸二氢钾 1.6g
蒸馏水 1000mL
3.2 乙液
氯化镁(化学纯) 40g
蒸馏水 100mL
3.3 丙液
0.4%孔雀绿水溶液
3.4 制法
分别按上述成分配好后,121℃高压灭菌15min备用。临用时取甲液90mL、乙液9mL、丙液0.9mL,以无菌操作混合即可。
注:本培养基亦称Rappaport 10(R10)增菌液。
4 DHL琼脂(Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose Agar)
4.1 成分
蛋白胨 20g
牛肉膏 3g
乳糖 10g
蔗糖 10g
去氧胆酸钠 1g
硫代硫酸钠 2.3g
柠檬酸钠 1g
柠檬酸铁铵 1g
中性红 0.03g
琼脂 18~20g
蒸馏水 1000mL
pH7.3
4.2 制法
将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400mL蒸馏水中,校正pH。再将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,两液合并,并加入0.5%中性红水溶液6mL,待冷至50~55℃,倾注平板。
5 伊红美蓝琼脂(ENB)
5.1 成分
蛋白胨 10g
乳糖 10g
磷酸氢二钾 2g
琼脂 17g
2%伊红Y溶液 20mL
0.65%美蓝溶液 10mL
蒸馏水 1000mL
pH7.1
5.2 制法
将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15 min备用。临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50~55℃,加入伊红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板。


