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病原微生物检测实验
作者:佚名 来源:生物秀 时间:2007-10-12

    附录:
    1 营养琼脂
    1.1 成分                                          
       蛋白胨                                       10g         
       牛肉膏                                       3g
       氯化钠                                       5g
       琼脂                                         15~20g
       蒸馏水                                       1000mL
    1.2 制法
       将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.2~7.4。加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化。分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。
    注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%
     
    2乳糖发酵管
    2.1 成分
         蛋白胨                                     20g
         乳糖                                       10g
         0.04%溴甲酚紫水溶液                        25mL
         蒸馏水                                     1000mL
         pH7.4
    2.2 制法
         将蛋白胨及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,按检验要求分装30mL、10mL或3mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min。
    注:①双料乳糖发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。
    ②30mL和10mL乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用,3mL乳糖发酵管供大肠菌群证实 试验用。
     
    3 氯化镁孔雀绿增菌液(MM)
    3.1 甲液
        胰蛋白胨                                    5g
    氯化钠                                      8g
    磷酸二氢钾                                  1.6g
    蒸馏水                                      1000mL
    3.2 乙液
    氯化镁(化学纯)                               40g
    蒸馏水                                      100mL
    3.3 丙液
    0.4%孔雀绿水溶液
    3.4 制法
        分别按上述成分配好后,121℃高压灭菌15min备用。临用时取甲液90mL、乙液9mL、丙液0.9mL,以无菌操作混合即可。
    注:本培养基亦称Rappaport 10(R10)增菌液。
     
    4 DHL琼脂(Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose Agar)
    4.1 成分
    蛋白胨                                      20g
    牛肉膏                                      3g
    乳糖                                        10g
    蔗糖                                        10g
    去氧胆酸钠                                  1g
    硫代硫酸钠                                  2.3g
    柠檬酸钠                                    1g
    柠檬酸铁铵                                  1g
    中性红                                      0.03g
    琼脂                                        18~20g
    蒸馏水                                      1000mL
    pH7.3
    4.2 制法
    将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400mL蒸馏水中,校正pH。再将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,两液合并,并加入0.5%中性红水溶液6mL,待冷至50~55℃,倾注平板。
     
    5 伊红美蓝琼脂(ENB)
    5.1 成分
    蛋白胨                                      10g
    乳糖                                        10g
    磷酸氢二钾                                  2g
    琼脂                                        17g
    2%伊红Y溶液                                20mL
    0.65%美蓝溶液                               10mL
    蒸馏水                                      1000mL
    pH7.1
    5.2 制法
        将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15 min备用。临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50~55℃,加入伊红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板。

     

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