五、实验报告
(一)菌落计数及报告方法
用肉眼观察,计平板上的细菌菌落总数,也可用放大镜和菌落计数器计数。记下同一浓度的三个平板上的菌落总数,计算平均值,再乘以稀释倍数即1mL检样中细菌菌落总数。各种不同情况的计算方法如下:
1首先选择平均菌落数在30~300之间者进行计算,当只有一个稀释度的平均菌落符合此范围时,则以该平均菌落数乘以其稀释倍数报告之(表10-1例1)。
2若有两个稀释度的平均菌落落在30~300之间,则按两者之菌落总数之比值来决定,若其比值小于2应报告两者之平均数,若大于2则报告其中较小的菌落总数(表10-1例2及例3).
3若所用稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(表10-1例4).

4.若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(表10-1例5)。
5.若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300之间,则以最接近300或者30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(表10-1例6)。
6.在求同稀释度的平均数时,若其中一个平板上有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌落约为平板的一半,而另一半平板上的菌落数分布很均匀,则可按半平板上的菌落计数,然后乘以2作为整个平板的菌落数。
7.菌落计数的报告,菌落数在100以内时按实有数报告,大于100时,采用二位有效数字,在二位有效数字后面的位数,以四舍五入方法计算。为了缩短梳子后面的零数,可用10的指数来表示。在报告菌落数位“无法计数”时,应注明样品的稀释倍数。
(二)大肠菌群测定结果记录
将10、1、0.1mL水样的发酵管结果查表10-2即得每升样品中的大肠菌群数。
表10-2 大肠菌群最可能数(MPN)检索表
| 阳 性 管 数 |
MPN 100 mL(g) |
95%可信限 | |||
|
1 mL(g)×3 |
0.1 mL(g)×3 |
0.01 mL(g)×3 |
下限 |
上限 | |
|
0 |
0 |
0 |
<30 |
<5 |
90 |
|
0 |
1 |
0 |
30 |
<5 | 130 |
|
0 |
2 |
0 |
60 |
. |
. |
|
0 |
3 |
0 |
90 |
. |
. |
|
1 |
0 |
0 |
40 |
<5 |
200 |
|
1 |
1 |
0 |
70 |
10 |
230 |
|
1 |
2 |
0 |
110 |
30 |
360 |
|
1 |
3 |
0 |
160 |
. |
. |
|
2 |
0 |
0 |
90 |
10 |
360 |
|
2 |
1 |
0 |
150 |
30 |
440 |
|
2 |
2 |
0 |
210 |
40 |
470 |
|
2 |
3 |
0 |
290 |
. |
. |
|
3 |
0 |
0 |
230 |
40 |
1 200 |
|
3 |
1 |
0 |
430 |
70 |
2 100 |
|
3 |
2 |
0 |
930 |
150 |
3 800 |
|
3 |
3 |
0 |
2 400 |
360 |
13 000 |
| 注1:本表采用3个稀释度(1 mL(g)、0.1 mL(g)和0.01 mL(g)),每稀释度三管。注2:表内所列检样量如改用10 mL(g)、1 mL(g)和0.1 mL(g)时,表内数字应相应降低10倍;用0.1 mL(g)、0.01 mL(g)和0.001 mL(g)时,则表内数字应相应增加10倍。其余可类推。 | |||||
(三)沙门氏菌检验结果记录
观察DHL平板上生长的菌落,挑取可疑菌落接种三糖铁琼脂,记录反应结果,看三糖铁琼脂斜面是否为红色,底部是否变黑并产气。
六、思考题
(1)大肠菌群的定义是什么?
(2)硫代硫酸钠在自来水取样中起什么作用?湖水取样中是否也需用到?
(3)EMB培养基含有哪几种主要成分?在检查大肠杆菌的时候,各起什么作用?
(4)DHL平板培养基和三糖铁琼脂内含有哪几种主要成分?各起什么作用?


