10)用含有10％牛血清和抗生素(如青霉素、链霉素)的DMEM(GIBCO／BRL)lOml再悬沉淀，并使终体积为20ml。
11)让残留的大块未破碎的组织或特殊颗粒物质沉降。可采用数层无菌纱布过滤细胞悬液以去除任何残留的细胞块。
12)为确定现有细胞浓度，加入0.2ml细胞悬液于1.8ml 1％醋酸溶液中以裂解红细胞，用血细胞计数器进行细胞计数。
13)按每细胞瓶I x 106细胞的数量接种于10ml组织培养液中，在饱和湿度的37°C CO₂培养箱中孵育直至细胞铺满。

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