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腺病毒载体及亚克隆构建中的一些经验分享
作者:erguo918 来源:丁香园 时间:2007-8-4

    我们实验室在半年时间里构建过500多个腺病毒载体,积累了很丰富的亚克隆构建的经验,愿意与大家分享,我想分以下几个专题进行讲解,
    一、大批量构建亚克隆载体的一些经验
    二、腺病毒载体系统的选择
    三、实验中的一些小技巧

    一、大批量构建亚克隆载体的一些经验
    1)善于利用生物信息学和计算机程序。
    A:批量下载基因序列
    我们要构建的每个基因都有它的Accession number 首先,需要利用生物信息学批量下载基因序列,如果单个基因一个一个的下载那需要下载一两天的时间,如果网速很慢的话,估计三天都下不完。
    我们的方法是,上NCBI网站http://www.ncbi.nlm.nih.gov/
    search下选nucleotide,将Accession number 都排列在一起,用空格隔开,不要有回车符,如:
    BC008983 BC010743 BC009720 BC014840 BC018164 BC013142 BC016174
    填好后就go,然后会出现这样一个界面

    点击7,又会出现下一个界面:

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