2.3 基因治疗体系的有效性问题
安全性和有效性是相辅相成的两个方面，在基因治疗中自然应两者兼顾，忽视任何一方都无法使基因疗法成为人类疾病治疗的有力武器。从广义上讲，靶向性也是有效性的一个重要方面，如果不能做到高效的基因转导，极有可能导致整个治疗计划的失败，况且，实际应用中整个治疗体系总是受到一系列主观或客观因素的制约，无法达到或实现理论上的完美。目前国内外用来提高逆转录病毒载体转染率的方法有：（ 1 ）多次重复感染 , 将包装细胞注射到肿瘤细胞周围 , 使其不断产生假病毒颗粒以感染肿瘤细胞，基于这一构想， Ram 在基因治疗脑瘤的实验中建立了将肿瘤细胞与病毒包装细胞 VPC 混合培养的生长模型，适当延长混合培养时间，使 VPC 持续释放含有目的基因的病毒颗粒，使更多处于不同细胞周期的肿瘤细胞被转染，这也弥补了逆转录病毒只能感染分裂期细胞的缺陷 ［ 6 ］ （ 2 ）用水泡性口炎病毒（ VSV ）包膜 G 蛋白替代原病毒蛋白来包装逆转录病毒，由此产生的 VSV － G 假型病毒载体具有以下优点： . 病毒滴度浓缩后达 10 9 CFU/ml ；具有广泛的宿主范围和更高的转染效率；能够抵抗血清补体灭活的作用；非细胞周期依赖的整合特性，可高效的转染静止细胞 ［ 7 ］ 。诸多的优点使该载体在造血系统疾病和肿瘤的基因治疗方面有潜在的应用前景。
3. 基于逆转录病毒的载体系统在基因治疗中的应用及前景展望
3.1 基因治疗有望攻克的疾病及现状
恶性肿瘤一直被视为人类第一大杀手，在临床化疗、放疗及手术治疗都未能给人类带来期望的疗效，而副作用却令人痛苦不堪、生死拼争，最终绝望的告别人世的时候，基因疗法又让人看到了希望。用逆转录病毒载体携带自杀基因 HSV-tk 系统用于多种肿瘤的治疗已进行了大量的试验，体外转染有基因表达持久而稳定的特点。特别是对脑胶质瘤的治疗已进入了临床试验阶段，而且在卵巢癌腹膜种植的动物实验中也取得了很好的效果，缺陷型逆转录病毒颗粒携带 HSV-tk 自杀基因，可成功转染胃癌细胞并表达，利用 HSV-GCV( 丙氧鸟苷 ) 药物治疗的旁观者效应可强化抗肿瘤基因治疗的效果 ［ 6 ］ 从肿瘤的病因学角度，分析肿瘤细胞的生长特点及染色体 DNA 序列的改变，利用抑癌基因、自杀基因或抗体基因抑制或杀伤肿瘤细胞，有望通过逆转录病毒载体系统的完善实现攻克这一人类杀手的目标和希望。除肿瘤外，许多遗传性疾病如血友病，生长激素缺乏症以及肝炎等病毒感染性疾病均可以逆转录病毒作为载体介导相应的治疗基因高效的转染靶细胞，从而在不断的完善中使基因治疗成为临床上占主导地位的治疗方法。
3.2 基因治疗的前景展望
近年来，载体系统的不断完善和发展，相关的基因治疗研究和试验报道层出不穷，真正意义上的突破却不容乐观。纵观十多年来基因治疗的发展进程，基因转移载体的大规模改进，在载体安全领域实现基因表达时间和水平的控制，增加基因转移载体与宿主生物相容性的理解成为国际社会健康组织密切关注的问题 ［ 8 ］ 。在现用临床治疗方法无法满足人类健康需求的时候，这种实验性新技术让人们看到了一线曙光，它的健康稳定的成长也应该有正确的医学目的作指导，有严格的法律法规作保证，才能在实践的基础上努力达到安全与高效的完美结合。
从对致瘤病毒的研究发现该病毒的逆转录特性，利用逆转录病毒基因与宿主细胞基因组的整合的特性介导并表达目的基因，经过改建后的逆转录病毒载体已用于基因治疗开始为人类造福。基因疗法作为一种新兴的治疗技术在让人类看到希望的同时，又给人类许多安全的警示，盲目的追求高效忽视安全并不是造福人类的最终目的。时代在发展，科技在进步，理论在创新，高科技研究成果的出现如同任何新生事物的诞生一样，运用合理，将有无限的生机与活力；应用不当，也会给人类造成极大的隐患。基因治疗从实验室走向临床摆脱困惑还有很长的路要走，许多问题也会不断产生 . 对于科学这把双刃剑 , 人们也只能在实践的基础上不断的探索，克服种种困难，最终立于不败之地 [9] 。
辩证唯物主义的观点告诉我们，任何新生事物的发展道路都不可能总是一帆风顺的。基因治疗替代先前的，不能满足人类需要的治疗方法是顺应历史及人类健康发展要求的，我们也毫不怀疑基因治疗曲折发展的上升趋势。充分尊重科学发展的自身规律，坚持基础研究与临床试验并举，正视难关，针对性的加强基础实验，逐个解决问题，同时把眼光放远，及时调整思维认识，随着分子技术的飞速发展，期望基因治疗会有一个美好的前景，实现真正的临床突破，造福人类指日可待。
作者简介：丁召兴，男，药剂科主任，主治药师。
参考文献
1. 唐镇生 . 分子外科与基因治疗 . 上海医科大学出版社 . 1999.
2. Maria De Angioletti ， Ana Rovira ， Michel Sadelain ， et al. Frequ ency of Missense mutations in the loding region of a Euharyotic gene transferred by retroviral vecto Journal of virology ; 2002,Feb;76(4).
3. 杨孔宾 . 基因治疗的安全性评价 . 国外医学遗传学分册 . 2001,24 （ 4 ）
4. 邹从清 . 试析基因治疗中的不当与恰当问题 . 医学与哲学 . 2002,3 （ 9 ）
5. 郑姝颖 . 增强基因治疗特异性的有效途径 . 国外医学与遗传学分册 . 2001,24 （ 1 ） .
6. 王毅 , 胡志前，徐学俊，等 . 逆转录病毒介导的 HSV-TK 基因系统对人胃癌细胞的转染及杀伤作用 . 第二军医大学学报 . 2001,22 （ 4 ） .
7. 王红卫 . VSV-G 假型反转录病毒载体在基因治疗中的应用 . 国外医学遗传学分册 . 2001,24 （ 1 ） .
8. Meyer F. Gene therapy: progress and challenges. Cell Mol Biol, 2001 ； 47(8)
9. 覃汉荣? 杨冬华 . 肝癌基因治疗的发展趋势及思考 . 医学与哲学 . 2002,23（ 4 ） .
