Stratagene的Brilliant系列则是以Core Reagent和MasterMix的形式提供(其实后者就是预混好的试剂,方便一些;前者就是各自分开的试剂,要自己混合,不过可以自己调整份量)。这一系列产品不单可用于Taqman探针法,还可以Scorpions,Amplifluor、杂交双探针法和分子信标等等,实在是非常通用的选择,同样都是严格热启动Taq酶,优化的试剂,可靠的公司信誉,还可以选择有dUTP + UNG的Plus配方。Brilliant的RT定量系列还分有单管和两步法可供选择。价格也和Qiagen不相上下,同样是50ul一次的反应原价是30多元,6月底前特价6折,如果反应体系25ul成本就降到9块钱左右。Brilliant的MultiPlex比Qiagen的便宜,也可以做4个target,原价是30块左右一次,生物通上6月特价是15块左右,反应体积减半价格就去到8块左右啦,价格直逼国产试剂。如果你是Stratagene的粉丝,就不要错过这个机会。
说实话,罗氏的杂交探针确实比Taqman更可靠,只是一直没有得到很好的推广。Roche主推杂交探针,但也没有忽略Taqman的市场,LightCycler TaqMan Master则是配合其LightCycler? 2.0 System Instruments推出的一套试剂盒(也可以在其它定量PCR仪器上使用,比如ABI的7500),LightCycler本身就以速度著称,而这个试剂盒以玻璃毛细管的形式提供,配合了热启动酶和优化Buffer,进一步提升了实验的速度,这两者的结合应该是目前所知定量PCR(或者RT-PCR)反应的“速度之王”了吧。就是价格比较吓人。
同类的产品还有不少,由于原理都差不多,就不一一列举。
[拓展用途]Taqman不仅在深度上得到了充分应用,而且逐渐也扩增了其广度。这一方面体现的特别显著的就是ABI的试剂了。
ABI号称有数以千记的Taqman试剂盒,除了上面提到的用于一般基因表达量分析的PCR或RT-PCR的试剂盒外,还有SNP分型,低密度表达谱试剂盒,miRNA,药物代谢等。其中TaqMan? Low Density Arrays主要用于配合芯片使用,即在芯片检测之后进行的进一步鉴定,其特点就是方便和节省试剂,而用于SNP分型的则包括Custom TaqMan SNP Genotyping Assays、TaqMan Drug Metabolism Genotyping Assays、TaqMan Pre-Developed Assay Reagents for Allelic Discrimination和TaqMan SNP Genotyping Assays四种,其中可以用于基础和临床研究的药物代谢基因分型试剂盒是目前唯一的一种可以用于药物筛选的SNP分析Taqman试剂盒,主要原理是利用涵盖了220个编码药物代谢的酶(DMEs)和相关转运蛋白的基因的2000多个位点,融合Taqman等位基因分辨技术进行多态性分析(见定量PCR Taqman探针的应用[高级篇])。
此外还有miRNA表达试剂盒,这一款ABI去年推出的试剂盒在其未商品化之前其实就已经进入实验室了,去年欧洲协会的人类遗传学年会就有实验室展示了利用这个产品获得的实验结果,其最重要的特征就是可以将成熟miRNA和前体区分开来,获得准确的分析结果,目前共有两款产品可供选择:Human Panel – Early Access Kit和ABM 000008 hsa-miR-16。
此外,除了Taqman探针法,罗氏的杂交探针是科研上更为严谨的选择,而试剂的选择自然以罗氏为主。Stratagene的Brilliant系列不单可以用于杂交探针,还可以用于分子信标、Scorpions,Amplifluor等其他的标记方法,如果你打算采用Taqman以外的方法,Brilliant是不错的选择。

