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RNAi技术:体外转录合成双链RNA
作者:佚名 来源:stlib.gd.cn 时间:2007-7-26

        该试剂盒也可合成单链RNA,在RNA结构研究,核酶化学,体外翻译,RNA蛋白相互作用,反义技术等方面有广泛应用。该试剂盒包含 LITMUS 双向转录克隆载体,适用体外如显微注射、细胞转染和体内RNA干涉在内的所有转录实验。

        该试剂盒包括足够的试剂可在2ml的反应体系中合成多至2mg的双链RNA,包括:LITMUS 28i 克隆载体,LITMUS 38i 克隆载体(LITMUS 28i和38i二者只是多克隆位点有所不同),对照载体,T7引物(19-mer), 5´-dTAATACGACTCACTATAGG-3´,10X 含NTP的缓冲液,T7 RNA聚合酶,上样缓冲液和电泳Marker 2-Log DNA Ladder (100–10,000 bp)等等。价格也相当,3750人民币。但是可惜的是试剂盒没有提供消化DNA模版和单链RNA的酶以及纯化的工具,需要另外购置。单独购买的相关产品生物通将在后文继续介绍。更多关于RNAi产品介绍请继续关注生物通技术前沿专栏。

    Figure 1: 用带插入子的 LITMUS 28i合成双链RNA

    Figure 2:  用HiScribe RNAi Transcription Kit体外合成单链和双链RNA。 LITMUS 38i 含1.3 kb荧光酶片段,分别用 PspOM I (P)和Stu I (S)剪切。产生的线形摸板再分别 (P 和 S ) 或一起转录(P/S),产生单链和双链RNA。琼脂糖电泳1 µl 反应液至少含0.5 µgRNA。

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