差异消减展示（differential subtraction display,DSD）是1998年Jose等[8]提出的，它是在DDTR-PCR呈现出差异条带之后，同时回收差异条带与对照方的相应范围的条带，靶方回收的差异条带用非生物素标记的引物与dNTPs进行PCR扩增，而对照方回收的差异条带用含生物素标记的dATP的dNTPs进行PCR扩增，其产物进行消减杂交，用链亲和素去除共有的产物，剩下的产物由带有α-32P dATP的dNTPs进行扩增，再重复差异展示，回收差异条带并克隆。此技术最大的优势是获得差异条带在Northern印迹上重现性好，假阳性少，敏感性强，可获得长片段，起始材料要求少，可获取低丰度差异表达基因，缺点是步骤繁琐，工作量大，周期性长，更多依赖于PCR技术。
另外，赵忠良博士把长片段PCR扩增（LPCR）与消并减杂交技术结合起来，建立了LPS技术，并运用此技术从抗原呈细胞中获取了170多个差异表达基因。此技术的基因原理是：T与D方分离出cDNA后，运用5´端帽子引物与3´端锚定引物，对cDNA进行大量扩增，其产物直接进行消减杂交，然后过柱子，去除相同的基因，剩余的部分再与D方cDNA进行二轮消减杂交，再过柱子，去除非差异部分，剩下的差异部分进行第三轮消减杂交，其产物进行分级分段克隆。这种方法最大的好处是：起始材料需要少，可获得差异基因，假阳性少，有可能获得全长差异表达基因。
总之，随着高效扩增的Taq酶与具有自动校正功能的Taq酶的出现，长片段PCR扩增技术的优化，差异表达基因克隆技术将会不断发展，但目前主要有以上几种方法，各有其优缺点，研究者应根据自己的实际情况，选择合适的技术方法，以其达到自己预期的目的。
参考文献
1 Liang P et al.Science,1992:257(14):967
2 Ito T et al.FEBS letters,1994;351:231
3 Ayala M et al.Biotechniques,1995;18(5):842
4 GenHunter Corporation,RNA imageTM,kit(cat NO.G501) for mRNA diflerential display,1996,April,12
5 Cui DX et al.Journal of the Fourth Military university,1998;18(6):601
6 Hubank M et al.Nucleic Acids Res,1994;22:5640
7 Diatchenko L et al.Proc Natl Sci USA,1996;93:6025
8 Jose RP et al.Analytical Biochemistry,1998;257:161
