试验程序（带手套操作）
1.将转录反应物稀释成浓度约为1μg/ml，即取前述转录标记物1μl加入99μlRNA稀释缓冲液，如果转录标记反应正常其浓度应大约为1μg/ml。
2.取5支Eppendorf管，按A、B、C、D、E顺序编号，将1μg/ml浓度的RNA标记物按下列方式稀释成一系列浓度：
编号 RNA标记物稀释方法 RNA终浓度
A 1μg/mlRNA 10μl＋RNA稀释缓冲液23μl 300pg/μl
B 1μg/mlRNA 5μl + RNA稀释缓冲液45μl 100pg/μl
C A 5μl + RNA稀释缓冲液45μl 30 pg/μl
D B 5μl + RNA稀释缓冲液45μl 10pg/μl
E C5μl + RNA稀释缓冲液45μl 3 pg/μl
3.将空白测试条置于一聚酯膜上，以每一浓度1μl的量在测试条上点样，在聚酯膜上做好点样浓度标记，切勿直接在测试条上做任何记号，切勿用手接触测试条。
4.室温干燥约2min.，同时制备测试溶液。
5.在2ml封闭液中加入1μl Anti-DIG-AP。
6.显色底物溶液：在2ml检测缓冲液中加入9μl NBT溶液和7μl BCIP溶液。
7.准备5个样品池（2.5 ~ 5ml容量），1～6顺序编号，依次加入2ml以下溶液。
①. 封闭液；
②. 抗体溶液（第5项）；
③. ③④⑤洗膜缓冲液；
④. 检测缓冲液；
⑤. 显色底物溶液（第6项）
8.将样品测试条和对照测试条按下列顺序在上述准备的溶液中浸渍处理，两步骤直接让多余的溶液滴在吸水纸上。
①. 封闭， 2min.→
②. 抗体结合， 3min.→
①. 封闭， 1min.→
③. 洗膜, 1min. →
④. 平衡， 1min. →
⑤. 显色反应（黑暗），5－30min.
9.显色反应30min.即停止反应（延长显色反应时间，会增加背景而影响结果比较），用水漂洗测试条，将其置于3mm Whatman滤纸上空气干燥，然后在光下检测。
结果评估
显色反应进行5～10min.时，对照测试条中300pg浓度的样点即会出现颜色，30min.时3pg的样点也可见颜色，随即停止颜色反应。漂洗后比较对照与待测样品颜色，根据对照浓度与待测样品的稀释浓度计算标记物的数量。
如果标记物浓度低于10－30pg则不适宜采用这一快速检测方法。
方法二、用DIG标记的RNA对照比较检测
试剂：DIG标记的对照RNA（浓度约为100μg/ml）其它试剂同方法一
