* 洗涤程序：洗洁精洗净，清水冲十次以上去除洗涤剂残留，然后冲去离子水3次，再用双蒸水1次，倒置于器皿柜中晾干。关上器皿柜的门防尘。
五、 培养液、试剂等相关操作规则
1. 从冰箱取放物品动作要迅速，关门时要检查门是否关好。按类别存放试剂。
2. 培养液母液是公用，由值日生负责配制，长期存放于-20℃。使用时按比例加入血清配成培养液工作液，打开使用后的母液存放于4℃，要注意避免污染。发现4℃存放的培养液量不足时及时从-20℃中预解冻，若-20℃中已没有储备，请及时通知值日生。
3. 分装好的血清长时间保存于-20℃，使用前放于4℃预解冻。从-20℃取用血清者需登记，并在血清管上签上使用者名字，若使用别人解冻的血清需征得同意以免耽误他人实验。按需解冻，避免反复冻融。
4. 原则上解冻好的血清应全部配成含血清的培养基备用，若有剩余，则暂存于4℃并尽快使用。尽量不要使用他人开过的血清，以免交叉污染。
六、 值日生工作职责
1. 每周值日生时间从周六开始，至下周五结束。
2. 值日周开始时需做的事情：在周六、日或之前准备好灭菌的枪头、离心管、干烤好的玻璃器皿，供未来一周的使用。配制消毒用的75%的酒精，制作酒精棉球，给细胞房内添加足够的95%乙醇供酒精灯使用。
* 新离心管灭菌前，先用去离子水过2-3次，再用双蒸水冲1次，烘干后用牛皮纸包好、灭菌。
* 75%的酒精可用750ml 95%的酒精加去离子水至950ml配制而成。
3. 值日周内每天需做的事情：开大紫外灯消毒细胞房15-30min；将装满浸泡物品的塑料桶拎出细胞房送洗，并将空桶放回细胞房；更换垃圾袋；检查培养箱内水量是否足够；检查灭菌物品的储备情况，以便及时补充；检查培养液母液、血清、酒精等公用试剂的储备情况。
4. 值日周结束前需完成的事情：星期五或前后一天内打扫细胞房。包括拖地，擦桌子、吊柜、清洁和整理抽屉，擦超净台、冰箱及桌上的仪器，给水浴锅加水或换水，洗细胞房专用的实验服和拖鞋，紫外消毒细胞房。切记给培养箱换MilliQ水，保证水质清洁！
* 若上周值日生及时给培养箱内水槽加足水，根据经验未来一周内培养箱不会干水，但值日生仍应经常检查，以便及时发现异常情况。
5. 每2周清洁一次培养箱：先将培养箱中的物品取出暂存于超净台内，对于比较敏感的细胞可以暂存于404细胞房的培养箱；将培养箱内的不锈钢板取出，包括4块横板和左右2块立着的架子，用酒精棉球清洁钢板和培养箱内壁；打开培养箱清洁内壁时动作要迅速，避免长时间敞开门使得大量不洁净空气进入，缩短过滤器的寿命；用紫外灯照射培养箱内部15min，手提紫外灯放入培养箱前要用酒精棉擦拭干净。
6. 配制培养液母液：培养液有RPMI1640和DMEM两种，配方见404公共配液房；配制培养基要提前干烤量筒、烧杯、250ml血清瓶，湿热灭菌滤器、血清瓶瓶盖，国产滤膜使用前用MilliQ水浸泡15min以上或过夜。
七、常用溶液的配制
1、 RPMI 1640：干粉一包，碳酸氢钠 2.0g，Hepes 2.38g，青霉素100u/ml，链霉素100ug/ml，搅拌1-2小时后调节pH值至7.2，定容至1L，过滤灭菌分装；
2、 DMEM：干粉一包，碳酸氢钠 3.7g，Hepes 2.38g，丙酮酸钠110mg，青霉素100u/ml，链霉素100ug/ml，搅拌1-2小时后调节pH值至7.2，定容至1L，过滤灭菌分装；
3、 胰蛋白酶：用D-Hanks配制，浓度为0.25％(W/V), 搅拌2小时后调节pH值至7.2，定容至1L，过滤灭菌分装；
4、 青霉素：80万单位/瓶，加入4ml PBS，配成浓度为200000U/ml的母液；
5、 链霉素：按质量体积比配制，用PBS配成浓度为200mg/ml的母液。
