1掌握薄层荧光法的原理及操作。
2掌握薄层色谱法在中药制剂鉴别中的应用。
二．基本原理
更年安片由地黄、泽泻、五味子、制何首乌等药味组成，可利用薄层色谱法对五味子和制何首乌进行鉴别。五味子中主要有效成分为木脂素类，五味子甲素为其主要有效成分之一，可吸收UV光，在硅胶GF254薄层板上形成暗斑，用对照药材和对照品进行对照，可鉴别制剂中五味子；制何首乌中主要有效成分为蒽醌类，主要为大黄素和大黄素甲醚等成分，在可见光下呈黄色，在氨蒸气中斑点呈红色，紫外光（254nm或365nm）照射下产生荧光，在硅胶G薄板上可在可见光、紫外光或显色后检视其斑点，用对照药材和对照品进行对照，可鉴别制剂中何首乌。
三．仪器与试药
1、双槽层析缸、玻璃板10×20cm、三用紫外线分析仪、分析天平(0.01mg)。
2、硅胶G、硅胶GF254。
3、五味子、何首乌（中国药品生物制品检定所）
4、五味子甲素、大黄素、大黄素甲醚（中国药品生物制品检定所）
5、更年安片（市售）
四．操作步骤
（一）五味子鉴别
1．薄层板制备：含0.3%的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶GF254薄层板（实验前自制）。
2．供试品溶液制备：取更年安片20片，除去糖衣，研碎，加氯仿30mL，置水浴上加热回流90分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿1mL使溶解，作为供试品溶液。
3．对照溶液制备：取五味子对照药材0.5g，同上法制成对照药材溶液。取五味子甲素对照品，加氯仿制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。
4．薄层层析：将薄层板的边缘修饰整齐，作好标记。用毛细管吸取上述三种溶液各4μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚（30~60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15﹕5﹕1）的上层溶液为展开剂，预平衡15~30分钟，展距10cm，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，分别在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（二）何首乌鉴别
1．薄层板制备：含0.5%氢氧化钠溶液的硅胶G板（实验前自制）。
2．供试品溶液制备：取更年安片，除去糖衣，研碎，加甲醇100mL，置水浴中加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10mL使溶解，再加盐酸2mL，置水浴上加热30分钟，立即冷却，用乙醚20mL分2次提取，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加氯仿1mL使溶解，作为供试品溶液。
3．对照溶液的制备：取何首乌对照药材1.5g，同上法制成对照药材溶液。取大黄素、大黄素甲醚对照品，加甲醇制成每1mL各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。
4．薄层层析：将薄层板边缘修饰整齐，作好标记。用毛细管吸取上述三种溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸（15﹕2﹕1）为展开剂，预平衡15~30分钟，展距10cm，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，分别在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的橙色荧光斑点；置氨气中熏后，可见光下检视，斑点变为红色。
五．思考题
硅胶GF254、硅胶G、硅胶H有何不同？实验中如何选择和使用？
