ROX以固定的浓度配在Master Mix中
ROX不参与PCR扩增，信号强度只与Mix用量有关
校准枪的误差（如试剂体积）、耗材质量（如管盖厚度、透光性能不一致）所导致的光能损失、
仪器稳定性（如孔间、批间温度的波动）的误差等
减少孔间差异和批间差异，提高数据的重现性和精度
ROX校准的效果
重复样品
重复次数请遵循统计学的要求
小样本统计，n>6
未知样品和标准品都要重复
所有复管在同样条件下完成PCR
•你为什么会想到做多重定量？
•多重定量能达到目的吗？
定量PCR的数据处理
绝对定量与相对定量
绝对定量与相对定量
•绝对定量
–优点：给出目标基因的绝对数量，数据容易处理
–缺点：必须有标准品，做标准曲线，难以制备和质控
