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显微摄影技术
作者:未知 来源:山东农业大学 时间:2006-11-29

    •(6)调视场光阑 收缩视场光阑,将聚光镜向上升到顶后,接近载物台往下降,直至看到多边形的视场光阑像为止,转动调中螺丝将视场光阑调正中,然后将视场光阑像多边形边缘放大到视野圆的外切。 
    •(7)调孔径光阑 取下目镜,放入辅助望远镜,旋动辅助望远镜,以看清孔径光阑像为止。调节对中螺丝,使孔径光阑处在正中。再开大孔径光阑到60%~80%。也可按刻度标记计算,如利用物镜10×,其数值孔径(NA)为0.25,即0.25×80%=0.2,即将孔径光阑调在刻度的0.2上。如是物镜40×,NA为0.65,即0.65×80%=0.52,即调在刻度0.52上。
    •(8)放入照相目镜 选用配置好的照相目镜(目镜上有“PHOTO”)倍数为10×。
    •(9)选用物镜 可选用平消色差物镜(N PLAN,PLAN)、荧石物镜(半平扬复消色差PL FLUOTAR)物镜或平场复消色差物镜(PLAPO),但以后者为最好
    •(10)调双直线 用调标本焦点照相的那只眼睛,边观察取景筒,边调节取景筒上螺旋,直至“+”字双线的双线间分开得非常清晰为止。 
    •(11)取景 以“24×36”的方框内选取组织部位作为拍摄范围。 
    •(12)装入底片 打开摄影装置上相机后背,按顺序插入胶卷,左手按着片头送入收片轴,使胶片卷入收片轴,稳妥后,关上后盖,等待2~3秒种后,即听到马达转动齿轮声,它将胶卷片头送入收片轴绕转住,约拉过胶卷上24个齿孔(三张画面长度),相机正面上的画幅记数窗口即呈现出“01”数字。 
    •(13)放滤光镜 用黑白全色片拍一般H. E染色组织片用绿色滤光镜(灯泡电压一般用6~9V);日光型彩色片用DLF 滤光镜(灯泡电压要调在10.5V以上);灯光型彩色片不用滤光片,而只将灯泡电压调在10.5V以上。
    •(14)核对  在曝光前要核对“+”字双直线,取景范围,对标本焦点,电压数,ASA(胶卷感光度), CAL(曝光指数), AUTO(自动曝光模式),FIX(手控曝光模式),检查无误后再拍摄。LEICA MPS 30/60型自动曝光控制器开机后的默认方式是自身识别胶卷的感光度,CAL为1.00,曝光模式为AUTO。         
    •(15)曝光 按LEICA MPS 30/60型自动曝光控制器的“EXPO”键,边按键,边观察相机的供片轴是否响动,画幅数字窗口是否显示出递增数字,如有响动和显示递增数字则表示自动曝光控制器运转正常,以后,继续拍摄2~36张,即按第12步~16步常规进行。如没有响动或不递增数字,即出故障。每拍摄一张应记录好标本名称、拍摄内容和放大倍数等。              
    •  (16)倒片  胶卷拍完后,相机会自动倒片,直至全卷倒完。(如一卷只拍了十几张不拍,需要将拍过胶卷部分取出来,这时要按相机正面上的倒片黑按钮进行倒片,记录当时拍的张数,以供下次接着拍剩余胶卷),当转到有片头响声后,才能打开相机后盖,取出胶卷。摄完的胶卷要用黑纸或底片盒装好,待冲洗。底片盒上要注明拍摄内容、拍完日期

    二、洗印和放大


    (一)底片冲洗 
    1.显影罐法  

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