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显微摄影技术
作者:未知 来源:山东农业大学 时间:2006-11-29

    (2) 确定曝光时间的方法

    Ø①经验法:除经验非常丰富的人外,一般不宜采用。
    Ø②试摄法:这是一种简单、易行、准确、可靠的确定曝光时间的方法。方法是用同一标本在相同条件下,按几何级数增加曝光时间拍得不同曝光时间的试摄底片,经显影和定影后,根据底片情况决定正确的曝光时间。
    Ø③测光表法:显微摄影中可使用的测光表有四种类型:⒈手持光电测光法;⒉显微摄影用的光电测光表;⒊显微摄影装置内装或外接式全自动曝光控制表;⒋装在普通相机内部的测光表。前两种可以通用,但不够精确,后两种方便而准确。

    显微摄影曝光参考表

    5.取景对焦和拍摄

    •(1)屈光度的调节
    •在侧视目镜取景器内有一玻璃屏,上刻双十字线。调节时,左右转动屈光度调节环,使侧视目镜取景器镜筒的前端伸缩,改变焦距,至清晰地分辨出双十字线止(见右图)。双十字线校准后,不能随意变动屈光度调节环,以防焦距改变。取景聚焦,只需使用显微镜调焦螺旋。
    •在显微摄影中要根据研究目的进行取景,取景的涵义是确定拍摄范围和物体影象在底片上大小(倍数)。专用显微摄影设备,在刻有双十字线的侧视目镜取景器的玻璃屏上刻有数种规格的长方形取景框。底片所能摄下的范围,并非视野所见的全部,仅是圆形视野中长方形部分(见右图)。 
    •取景时,要使被摄的物体影象中心位于长方形取景框的对角线中心,并使两者的长短相应。需要90°调整时,转动载物台或摄影装置,让影象的长轴和取景框横轴平行。影象的大小可采用调换物镜和目镜来控制。
    (2)取景
    (3)聚焦与拍摄 
    Ø转动显微镜的粗细调焦螺旋,改变物镜和被检物体的距离,使视野中物体影象的焦点聚于暗箱的焦平面上。 
    Ø纵横移动镜台的制片标本,寻找拍摄的图象;上下转动调焦螺旋,辩清标本的细微结构。取景聚焦,需几经反复。底片影象的清晰度决定于拍摄前的最终一次准焦。 
    Ø取景聚焦完毕,立即揿下快门按钮,任何有关操作,都要在聚焦前完成。准焦后的微小颤动,也会引起焦点的改变,致使拍出的底片影象模糊不清。 

    6.记录 
    •由于显微摄影是记录科学研究结果的一种方法,因此在显微摄影中,每拍一张或每拍一批都要详细记录已拍底片的拍摄条件和情况,如被摄标本特点、仪器组合、照片条件、曝光时间、底片型号等,以作往后工作参考。  

    徕卡DMLB型显微镜带MPS 30/60 型显微镜摄影控制器操作程序
    •(1)清洁 对显微镜机械、电路、光学元件、相机以及自动曝光控制装置清诘。不仅要严格要求仪器的洁净,而且对桌、椅、地板也保持干净,室内尽量少灰尘。
    •(2)接电源 将LEICA DMLB型显微镜和LEICA MPS 30/60型自动曝光控制器接上稳压器的输出电源接线板插座210V~215V上。
    •(3)打开开关 显微镜底座左边露出半圆黑色转板,将其向外转到1~2V的点上,再打开镜座左边前沿的红色开关,镜座上透射出的微弱的光亮,待灯丝预热1~2分钟后再调用。
    •(4)调双目镜同焦 先对左边目镜,旋动粗调焦螺旋,使载物台的载玻片靠近10×物镜,再用左眼看左边目镜,边看边下调载物台,当看到标本组织的清晰像后,再微调到最清晰为止。然后调右边目镜,这时就不去调粗,细调焦螺旋,仅调右目镜上的上下移动螺纹,使右目镜焦距调到视野中标本组织像最清晰为止。这时,左、右两目镜即能适应您的双眼的同焦。 
    •(5)调瞳距 将双目镜筒用双手拿住,边往里外伸缩,边用双眼观察视野标本,使两个视野合并到一个圆视野为止。 

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