1、分离培养接种法---平板划线法：
被检材料如粪便、痰、脓汁、尿液、脑脊液等常混杂有多种细菌，平板划线法可使混杂的细菌在琼脂平板表面分散生长，各自形成不同的菌落，再根据菌落的形态特征，挑选单个菌落继续培养，以此分离获得纯种细菌，用于进一步研究、鉴定或保存。
平板划线的方法根据待检标本中细菌的数量来选择，可分为平行划线法和分区划线法两大类。
【材料】葡萄球菌和大肠杆菌混合菌液、普通琼脂平板。
【方法】
（1）平行划线法：常用于含菌量较少的标本。
①烧灼接种环，待冷，取一接种环菌液。左手斜持平皿（450角），用拇指打开皿盖，使其与皿底间分开成2～3cm宽的缝隙，靠近火焰周围，右手握持沾菌之接种环伸入皿内，在平皿上端1/6范围来回划线，密集涂布。
②烧灼接种环，待冷后（是否冷却可在平板培养基边缘无菌处接触一下，若琼脂溶化表示尚未冷却），通过原划线处作连续平行划线（如图2-1A）。划线时使接种环与平板成300～400角，轻触平板，用腕力将接种环在平板表面行轻快的滑移动作来回划线，划线间距适当，不能重叠，接种环也不能嵌入培养基内划破琼脂表面，并注意无菌操作，避免空气中的细菌污染。
③接种完毕后，盖皿盖，将接种环火焰灭菌后放回，用记号笔在皿底玻璃上注明标本名称，接种者班级、姓名、日期等，将培养皿倒置（平皿底面朝上，以避免培养过程中凝结水自皿盖滴下），送进温箱。
④经37℃18～24小时孵育后取出，观察琼脂平板表面细菌生长情况，注意菌落的特征。
（2）分区划线法：用于含菌量较多的标本。
同上法通过原划线处作连接平行划线，划线范围占平板的1/3～1/5；种毕, 旋转平板，接种环用火焰灭菌，冷却，再通过前一段划线在平板另1/3～1/5面积内作连续平行划线；如此重复3～5次（如图2-1B和2-1C）。
接种完毕后，盖皿盖，接种环火焰灭菌后放回。同上在皿底玻璃上注字后，将培养皿倒置，送进温箱培养，37℃18～24小时后取出，观察菌落特征。
2、纯种细菌接种法
细菌分离成纯种细菌后，常需接种至各种有关培养基，以扩大繁殖，做进一步鉴定。根据培养基的物理性状，纯种接种法有斜面培养基接种法，液体培养基接种法和半固体培养基接种法三类。
【材料】葡萄球菌或大肠杆菌18～24小时斜面培养物各一支、固体琼脂斜面培养基、肉汤培养基、半固体琼脂培养基。
