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实验小鼠相关操作技术
作者:未知 来源:台湾国防医学院 时间:2006-11-1

    以23 G的针头刺开隐静脉,以毛细管收集流出之血液,采得足够之血量后将动物的后脚弯曲以减少开创部位的血流量,再将毛细管内的血液送入微量离心管,最后再以灭菌棉花直接加压开创部位以止血。经过24小时候相同部位可以继续采血。

    (三)斩首采血法:
    此法取得之血液因可能会受动物的其它体液污染。将小鼠摇晃或麻醉使其无法动弹,再以强力的剪刀或断头器将动物斩首后迅速以容器装盛。

    (三)眼角采血:
    可麻醉或徒手保定。采血时可视需要选择有或无抗凝剂处理之毛细管或巴士德吸管。以毛细管由眼窝前端边旋转边向、向后插入眼窝内静脉丛,待毛细管可见出血时,倾斜毛细管,使血液流入毛细管中。采血时间尽量缩短以避免凝血,采血后需注意止血。采血过程不可过于粗暴而伤及眼球或哈氏腺。

    (四)心脏采血:
    动物需经安乐死或麻醉后才可进行心脏采血,采血结束也需将动物安乐死。将动物仰卧置于台面,下针的位置位于剑状软骨突下方,约与腹部呈15至30度角向胸腔缓缓推入,一发现有血液流入针筒,即固定针头开始缓慢抽血。

    四、胃管灌注 
    胃管灌注能使药剂经胃管直接投入胃中,进行胃管灌注时不可使用一般的针头,需使用经处理过的球型针头,可避免对动物造成伤害。插入之前需先测量动物由口腔至胃的距离选用适当长度的胃管,以避免插入胃管时插入过深造成动物胃的伤害,或是插入过浅使灌注物无法达到胃部。以注射针筒吸取药物,再保定动物,将胃管球型头置入动物口腔中,经喉背滑入食道到达胃内部,如果在插入过程遇到阻碍,需立即拔出,重新再插入,胃管插入胃后,迅即注射,注射完立刻拔出胃管。胃管灌注建议的最大灌注量为20 ml/kg。
    五、注射
    小鼠注射建议使用大于23 G的针头,且尽量使用较短的注射针。
    (一)肌肉注射: 
    小鼠不适合肌肉注射给药,请选择其它给药方式。小鼠的肌肉层都很浅薄,肌肉注射会造成小鼠不适或肌肉坏死。
    (二)皮下注射:
    事先以注射针筒吸取欲注射的剂量。保定动物,注射部位颈部上方皮肤需以酒精消毒。以拇指与食指将颈部上方皮肤拧起,以针头插入皮肤拧起后产生之凹陷处,试着回抽针筒,如有血液或液体回流,表示不适当,需重新插入。确定插入正确位置后,缓缓将药剂推入。皮下注射建议的最大注射量为20 ml/kg,可分成2至3处区域注射。
    (三)腹腔内注射:
    事先以注射针筒吸取欲注射的剂量。保定动物,头部朝下腹部朝上,注射针头以30度角插入腹中线右侧。试着回抽针筒,如有血液或液体回流,表示不适当,需重新插入。缓缓将药剂推入。腹腔内注射建议的最大注射量为20 ml/kg。
    (四)静脉注射:
    小鼠一般静脉注射区域有二,一为尾根部左右侧之静脉,另一为直接由眼球周围注入眼窝之静脉丛。将小鼠尾巴置于40℃温水中或以加热灯照射5至10分钟,使尾巴血管扩张。保定方式可以使用保定架,或将小鼠尾巴穿过PC盒铁盖之铁丝间隙,一手拉直尾巴。以酒精消毒后,针头与尾巴呈20至30度角下针,下针时针尖斜面朝上,针尖进入静脉时会有一瞬间通畅的感觉,若仅插入皮下则会持续感到针尖受阻。
    由眼窝血管丛注射时,可先麻醉动物,以拇指、食指及中指捏挤小鼠头颈部皮肤,使小鼠眼球突出眼窝,而由突出之眼球周缘-固定眼球之肌肉处,向眼球之底侧下针约2至3 mm深,即可注入。注射应徐缓,勿刺入眼球,注射时应徐缓,若药剂露出,可利用另一侧之眼窝,保定时勿将小鼠颈部捏的太紧或太久,以避免小鼠窒息死亡。
    建议的静脉最大注射量为20 ml/kg。
    六、粪便与尿液的收集
    (一)代谢笼:以代谢笼单独饲养动物,代谢笼可以定量动物每日摄食之食物与饮水量,又因其能将粪尿分离,所以也能定量每日动物之排份与排尿量。
    (二)直接采集:小型囓齿类动物通常在有人接触时,就会因惊吓而排便或分泌尿液,故可在保定时,同时采集尿液与粪便。
    (三)导尿管:雄性之天竺鼠或兔子可以使用外径0.5 mm的导尿管收集尿液,但除非非常了解这些动物的泌尿生殖解剖构造,某则很难应用于同种之雌性动物。

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