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实验小鼠相关操作技术
作者:未知 来源:台湾国防医学院 时间:2006-11-1

    一、技术:
    保定的定义,是指使用手或以器械对动物个体之活动作部分或完全之限制,以便进行检查、采样、投药、治疗或进行实验操作等之手段而言。保定无疑是进行所有动物实验前的基本步骤,但在进行实验的过程中也需避免使动物产生不必要的伤害,以下为进行实验动物保定时之重要须知:
    (一) 不可将保定装置视为正常之饲养方式。
    (二) 不可紧紧为处理或控制上图方便,而恣意使用保定装置。
    (三) 在可完成实验目的为前提下,需尽量缩短保定之时间。
    (四) 在进行保定之前,应训练动物去适应保定设备与进行保定的人员,保定人员也应预先熟练保定相关之技术。
    (五) 保定期间若动物有受伤或不适之情形时,则应将动物暂时性或永久性移离保定装置,并进行必要之治疗。

    二、小鼠的保定与抓取  
    (一)小鼠的抓取,可以拇指与食指轻挟小鼠的尾巴后提起。如果将小鼠半悬空于PC盒铁盖上,则小鼠会自然地以前肢抓紧铁盖,如此可以进行皮下注射或阴道冲洗抹片等操作。

    (二)如需强制性较高之操作,可用右手抓住小鼠尾巴,以左手拇指及食指抓其颈背部皮肤,使小鼠仰卧于无名指和中指间,再以小指与无名指夹住小鼠尾巴。
    (三)小鼠保定器(左图)

    三、小鼠的采血:
    采血对非专职实验动物从业人员而言,是一门难度颇高的技术。采血的技术只能靠熟能生巧与细心的摸索正确的手感来精进。

    采血会造成实验动物较严重的紧迫,因此建议给予适当的麻醉或镇静,可以有助于采血过程的顺畅。

    成年小鼠的总血量是1.6至3.2 ml,单次采血的建议量为0.2至0.3 ml,放血可得之总血量是1至1.5 ml。少量采血时可以使用眼角采血及尾巴采血,大量采血则采用心脏采血。

    心脏采血之困难度较高,且需牺牲动物。除非将动物牺牲,否则所有的采血法皆需确认动物的伤口以完全止血不在出血后,才可将动物放回PC笼内。

    (一)尾巴采血: 
    动物如不麻醉则需以保定器保定。将尾巴置于40℃温水中5至10分钟,使尾巴血管扩张,使用25至30 G的针头由尾巴左右两侧之尾静脉或腹侧的尾动脉下针抽血,或仅以25至30 G的针头插入尾动脉中,确认有血液流出后再以离心管承接。

    (二)隐静脉(Saphenous vein)采血:
    将动物徒手保定或者将动物塞进适当直径与长度的透明塑料管,藉由固定且紧绷小鼠大腿与尾巴之间的皮肤来伸直其大腿,剔除大腿外侧之皮毛,即可在踝关节的上下端见到隐静脉,将剃毛部位以酒精消毒。

     

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