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影响血液凝固的因素
作者:未知 来源:华中农业大学 时间:2006-10-23

    [实验目的] 
      以血液凝固时间作为指标,了解对血液凝固影响的因素,加深对生理止血过程的理解。
    [实验原理] 
      血液凝固是一个酶的有限水解激活过程,在此过程中有多种凝血因子参与。根据凝血过程起动时激活因子来源不同,可将血液凝固分为内源性激活途径和外源性激活途径。内源性激活途径是指参与血液凝固的所有凝血因子在血浆中,外源性激活途径是指受损的组织中的组织因子进入血管后,与血管内的凝血因子共同作用而启动的激活过程。
    [实验对象]
      家免。
    [实验药品] 
      25%氨基甲酸乙酯溶液,肝素(8 U/ml)、2%草酸钾溶液、生理盐水,液状石蜡、肺组织浸液(取兔肺剪碎,洗净血液,浸泡于3~4倍量的生理盐水中过夜,过滤收集的滤液即成肺组织浸液,存冰箱中备用)。
    [仪器器械]  
      免手术台,常规手术器械,动脉夹,动脉插管(或细塑料导管),注射器,试管8支,小烧杯2个,试管架,竹签1束(或细试管刷),秒表。
    [实验方法与步骤]  
      1.静脉注射氨基甲酸乙酯溶液,按5 ml/kg的量,将兔麻醉,仰卧固定于兔手台上。正中切开颈部,分离一侧颈总动脉,远心端用线结扎阻断血流,近心端夹上动脉夹。在动脉当中斜向剪一小切口,插入动脉插管(或细塑料导管),结扎导管以备取血。
      2.试管准备好。
      试管1   不加任何处理(对照管)
      试管2   用液状石蜡润滑整个试管内表面
      试管3   放少许棉花
      试管4   置于有冰块的小烧杯中
      试管5   加肝素8U
      试管6   加草酸钾1~2 ml
      试管7   加肺组织浸液0.1 ml
      3.放开动脉夹,每管加入血液2 ml。将多余的血盛于小烧杯中,并不断用竹签搅动直至纤维蛋白形成。
      4.记录凝血时间   每个试管加血2 ml后,即刻开始计时,每隔壁15 s 倾斜一次,观察血液是否凝固,至血液成为凝胶状不再流动为止,记录所经历的时间。5、6、7号试管加入血液后,用拇指盖住试管口将试管颠倒两次,使血液与药物混合。
      5.如果加肝素和草酸钾的试管不出现血凝,可再向两管内分别加入0.025 mol•L-1的CaCl溶容液2~3滴,观察血液是否发生凝固?
    [注意事项]  
      1.采血的过程尽量要快,以减少计时的误差。对比实验的采血时间要紧接着进行。
      2.判断凝血的标准要力求一致。一般以倾斜试管达45o时,试管内血液不见流动为准。
      3.每支试管口径大小及采血量要相对一致,不可相差太大。
    [实验结果]
      将实验结果及各种条件下的凝血时间按表8.8填写,并进行比较、分析解释产生差异的原因。

     

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