②左手拉住腹主动脉上结扎线头，于动脉球上剪一小口，将装有鱼用生理盐水的的蛙心套管插入动脉球，并顺势推入心室，此时可以看到套管内的液面随心脏搏动而上下移动。用滴管不断更换套管中的灌流液，冲洗心室直至没有血液为止，束紧备用线连同套管尖端一起结扎，并将线头系在套管壁上的小突起上，达到固定作用。最后剪断腹主动脉，提起心脏用线尽量远离静脉窦将其他血管结扎。在结扎外方剪断各组织。此时心脏完全离体，借灌流液而正常搏动。
2.实验装置连接
按图7.3-3将蛙心插管固定于支架上，在心室舒张时将连有一细线的蛙心夹在心脏舒张时夹住心尖，并将细线以适宜的紧张度与张力换能器相连。张力传感器的输出线与计算机生物信号采集处理系统或二道生理记录仪的输入通道相连。
2.实验项目
（1）记录心脏在只有任氏液（鱼生理盐水）时的收缩曲线，观察心率及收缩幅度，并将其作为正常对照。
（2）Na+的作用：用吸管吸出插管中的任氏液（鱼生理盐水）后，换以等量的0.65％氯化钠溶液，记录并观察心跳的变化。有变化出现时，应立即将插管内液体吸出，并以等量任氏液换洗2～3次，至心跳恢复正常。
（3）Ca2+的作用：将1～2滴2％的氯化钙溶液加入灌流液中，记录并观察心跳变化。有变化出现时，应立即以等量任氏液换洗数次，至心跳曲线恢复正常。
（4）K+的作用：将1～2滴2％的氯化钾溶液加入灌流液中，记录并观察心跳变化。有变化出现时，应立即以等量任氏液换洗数次，至心跳曲线恢复正常。
（5）肾上腺素的作用：将1～2滴1：10000肾上腺素加入灌流液中，记录并观察心跳变化。有变化出现时，应立即以等量任氏液换洗数次，至心跳曲线恢复正常。
（6）乙酰胆碱的作用：将1～2滴1：10000乙酰胆碱加入灌流液中，记录并观察心跳变化。有变化出现时，应立即以等量任氏液换洗数次，至心跳曲线恢复正常。
（7）酸的作用：将1～2滴3%的乳酸加入灌流液中，记录并观察心跳变化。有变化出现时应立即以等量任氏液换洗数次，至心跳曲线恢复正常。
［注意事项］
1.制备离体心脏标本时，勿伤及静脉窦。
2.蛙心夹应在心室舒张期一次性夹住心尖，避免因夹伤心脏而导致漏液。
3.每一观察项目都应先描记一段正常曲线，然后再加药并记录其效应。加药时应在心跳曲线上予以标记，以便观察分析。
4.各种滴管应分开，不可混用。
5.在实验过程中，插管内灌流液面高度应保持恒定；仪器的各种参数一经调好，应不再变动。
6.给药后若效果不明显，可再适量滴加，并密切注意药物剂量添加后的实验结果。给药量必须适度，加药 出现变化后，就应立即更换任氏液，否则会造成不可挽回的后果，尤其是K＋，H+稍有过量，即可导致难以恢复的心脏停跳。
7.标本制备好后，若心脏功能状态不好（不搏动），可向插管内滴加1～2滴2%CaCl2或1：10000肾上腺素，以促进（起动）心脏搏动。在实验程序安排上也可考虑促进和抑制心脏搏动的药物交换使用。
8.谨防灌流液沿丝线流入张力传感器内而损坏其电子元件。
[问题与解释]
1.插管插入后,管中的液面不能随心脏搏动而波动,或波动幅度不大，影响结果的观察。
(1) 插管插到了主动脉的螺旋瓣中，未进入心室。
(2)插管插到了主动脉壁肌肉和结缔组织的夹层中。
(3)插管尖端抵触到心室壁。
(4)插管尖端被血凝块堵塞。
2.插管后，心脏不跳动。
（1）心室或静脉窦受损。
（2）插管尖端深入心室太多；或尖端太粗，心脏太小（鱼类容易出现）影响到心室脏的收缩。
（3）心脏机能状态不好。
[实验结果]
剪贴记录曲线，并对实验结果进行分析讨论。
