一 原理：
细胞质骨架是由微管（20—25nm）、微丝（5—6nm）和中间纤维(7—11nm) 构成的细胞质内的网状结构，具有支持、运动、物质运输等功能。
用适当浓度的TritonX—100处理细胞，可抽提掉细胞质内结合在膜结构上的蛋白质，而仅保存骨架蛋白。经戊二醛固定，蛋白质的特异性染料考马斯亮蓝染色后，就可以在光学显微镜下观察到细胞质骨架的网状结构。
二 实验材料： 1. M－缓冲液 咪唑（pH6.7） 50mM MgCl2 0.5mM KCl 50mM EGTA[乙二醇双（α－氨基乙基）醚四乙酸] 1mM 巯基乙醇或DTT（二硫苏糖醇） 1mM EDTA 0.1mM 2. 磷酸缓冲液（PBS） NaCl 80g Na2HPO4 2H2O 0.6g KCl 4g KH2PO4 0.6g 蒸馏水 1000mL 使用时用蒸馏水稀释10倍 3. 1%Triton-100 用M－缓冲液配制 4. 0.2%考马斯亮蓝R250 考马斯亮蓝R250 0.2g 甲醇 46.5mL 冰醋酸 7.0mL 蒸馏水 46.5mL 5. 3%戊二醛 用磷酸缓冲液将25%戊二醛稀释成3%戊二醛
新鲜洋葱鳞茎的内表皮
三 实验器材：
滴管、载玻片、盖玻片、镊子、剪刀、10mL小烧杯、显微镜
四 试剂：
五 操作步骤：
1.撕取洋葱鳞叶内表皮若干片，大小约1cm2，置于青霉素小瓶或小烧杯中。
2.用磷酸缓冲液（PBS）浸泡片刻。
3.吸去磷酸缓冲液，用1% TritonX—100处理20分钟。抽提细胞骨架以外的蛋白质，从而使骨架图像更加清晰。
4.吸去TritonX-100，用M—缓冲液洗3次，每次3分钟。M－缓冲液有稳定细胞骨架的作用。
5.用3%戊二醛固定15—20分钟
6.用PBS洗3次，每次3分钟
7.考马斯亮蓝染色15分钟
8.蒸馏水洗2次
9.置于载玻片上，盖上盖玻片，在光学显微镜下观察。
六 实验结果：
绘出洋葱鳞叶内表皮细胞内细胞质骨架的分布图。
