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免疫组织化学技术常用试剂的配制
作者:未知 来源:生物秀 时间:2006-10-18

    将清洁的载玻片置上述液体中浸泡数分钟后,烤干备用,可防止脱片。
     2.甲醛明胶液
        40%甲醛                          2.5ml
        明胶                             0.5g
        蒸馏水                           至100ml
    配制方法:将少许蒸馏水(约80ml)将明胶加热溶解,待完全溶解后,加入甲醛,最后补充蒸馏水至100ml备用。用法同铬矾明胶液。
    3. APES液
       APES                               1ml
       丙酮                               50ml
    配制方法:取APES 1ml,加丙酮50ml,充分搅拌均匀备用。将清洁的载玻片放入APES液中20~30秒后,取出,用丙酮液洗去多余的APES液,注意不要留有气泡,晾干备用。经该方法处理的玻片具有良好的防脱片能力。
    4.多聚赖氨酸液
      多聚赖氨酸(Poly-L-Lysine)          1ml
      蒸馏水                               10ml
    配制方法:取市售Poly-L-Lysine 1ml,加入蒸馏水10ml,置塑料容器中,将清洁的玻片放入该液中5分钟,取出放置无尘干燥箱中晾干备用或60oC干燥箱烤干备用。所需容器不能用玻璃制品。经该方法处理的玻片具有很强的粘合能力。但价格较APES贵得多。
    五、封固剂
    1. 缓冲甘油
       纯甘油(分析纯)                     20ml
       0.5M碳酸缓冲液(PH9.5)             20ml
    配制方法:取纯甘油20ml,加入碳酸缓冲液20ml,充分混合,待气泡完全消失后,即可使用。
    2. 甘油-TBS(PBS)
       纯甘油                        90ml
       0.01MTBS                      10ml
       纯甘油                        75ml
       0.01MPBS                      25ml
     配制方法:按上述比例将甘油和TBS(PBS)充分混合后,置4oC静置,待气泡完全消失后,即可使用。
    3. 甘油明胶
       明胶                          10g
       甘油                          10ml
       蒸馏水                        100ml
       麝香草酚                      少许
      配制方法:称取10g明胶于温热(40oC)的蒸馏水中,充分溶解后过滤,再加入12ml甘油混合均匀。少许麝香草酚是为了防腐。
    4. 液体石蜡
     液体石蜡因含杂质少,很少引起非特异性荧光,故常用于免疫荧光时标本的封固。
    5.DPX
      Distrene                        10g
      酞酸二丁酯                      5ml
      二甲苯                          35ml
      DPX为中性封固剂,用于多种染色方法均不易褪色,但使组织收缩较明显,故应尽量使其为均匀的一薄层。
    六、 复染剂
    1. Mayer氏苏木素
    配制方法详见第一篇第四章第四节。
    2. 甲基绿
       甲基绿                          2g
       蒸馏水                          100ml
    复染后水洗数次,常规脱水封片。
    3. 核固红
       核固红                          0.1g
       硫酸铝                          15g
       蒸馏水                          100ml
    配制方法:将核固红溶入15%硫酸铝水溶液中,加热溶解,冷却过滤后备用。复染后用流水冲洗数分钟后,常规脱水封片。

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