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免疫组织化学技术常用试剂的配制
作者:未知 来源:生物秀 时间:2006-10-18

    6. α-萘酚显色液(3)
     α-萘酚                                 15mg
     DMF                                    0.5ml
     坚固蓝BB盐                            30mg
     0.05M Tris-HCL(PH9.1)                    50ml
     左旋咪唑                                12mg
       配制方法:先将α-萘酚溶于DMF中,加入坚固蓝,再加入Tris-HCL缓冲液,最后加入左旋咪唑,完全溶解过滤后立即使用。显色为37oC,15~30分钟,用0.1%中性红复染30秒~1分钟自来水冲洗,丙酮分化5秒钟,流水冲洗。
      阳性结果为蓝色,细胞核为红色或紫色。
    银显色液
    ⑴ 硝酸银显色液
     ①2%明胶(或25%阿拉伯胶水溶液)         60ml
     ②枸橼酸缓冲液(PH3.5)                 10ml
     ③对苯二酚               1.7g加双蒸水至10ml
     ④硝酸银                  50mg加双蒸水至2ml
    ①~③液用前依次混合,最后加入④液,注意避光。
    ⑵ 乳酸银显色液
     ①20%阿拉伯胶                           60ml
     ②枸橼酸缓冲液(PH3.5)                 10ml
     ③对苯二酚                        0.85g/15ml
     ④乳酸银                          110mg/15ml
    以上①~③液用前依次混合,最后加入④液,注意避光。
    上述两种显色液的25%阿拉伯胶可用双蒸水代替,但此时反应明显加快,要在镜下密切观察。
    ⑶ 醋酸银显色液
     ①硝酸银                           100mg/50ml双蒸水
     ②10%明胶                                10ml
     ③枸橼酸缓冲液(PH3.5)   1.7g加双蒸水至10ml
     ④对苯二酚                              600mg
     配制方法:将对苯二酚溶于③液,然后将②③液混合过滤,再加入①液。
    三、酶消化液
      1. 0.1%胰蛋白酶
    胰蛋白酶                         100mg
    0.1%氯化钙(PH7.8)              100ml
      配制方法:先配制0.1%氯化钙,用0.1M的NaOH将其PH值调至7.8,然后加入胰蛋白酶充分溶解。用前将胰蛋白酶消化液在水溶中预热至37oC,消化时间10~30分钟。
      2. 0.4%胃蛋白酶
    胃蛋白酶                          400mg
    0.1N HCL                          100ml
    配制方法:先配制0.1N HCL,然后将胃蛋白酶充分溶解,预热至37oC后使用,消化时间30分钟左右。
    四、粘合剂
      1. 铬矾明胶液
    铬矾(或甲铬矾)                 0.5g
    明矾(Gelatine)                 5g
    蒸馏水                           1000ml
    配制方法:先将少许蒸馏水溶解铬矾(硫酸铬钾)后,再加入明胶及蒸馏水,于70oC水溶液中胶溶化后置电动磁力搅拌器上,持续搅拌均匀,如有沉渣可过滤后使用。

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