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病原微生物染色法
作者:未知 来源:生物秀 时间:2006-10-18

     
    五、铬酸P、A、S(真菌类染色)
    ⑴石蜡切片2-3微米,脱腊常规至水。
    ⑵4%铬酸氧化1小时。
    ⑶流水冲洗5分钟,蒸馏水洗2分钟。
    ⑷冷雪夫氏(Cold Sohiff)液,15-20分钟。
    ⑸0.5%偏重亚硫酸钠水溶液5分钟(更换2次)。
    ⑹水洗5分钟。
    ⑺蒸馏水洗,至70%酒精洗2分钟。
    ⑻醛复红染液30分钟。
    ⑼95%酒精洗(洗去多余染料)。
    ⑽蒸馏水洗,入淡绿染液30秒钟。
    ⑾蒸馏水速洗(镜下观察)。
    ⑿曲霉菌、念球菌属、细胞浆菌属、隐球菌属为红紫色。曲霉菌丝周边紫红色,弹力纤维紫色,背景绿色。
     
    六、病毒包涵体染色法
    1、Mann氏甲基蓝伊红染色法
    Mann氏甲基蓝伊红染色法,是一种病毒包涵体的染色法,在HE染色切片上包涵体就能显示出来,用这一染色法则更清楚。
    操作方法:
    (1)切片脱蜡至水。
    (2)用Mann氏染液染色8-24小时(染液要新配制)。
    (3)蒸馏水洗。
    (4)用碱性酒精分化(40%氢氧化钠2-3滴,无水酒精100ml)约30秒钟。
    (5)两酮速脱水。
    (6)二甲苯透明、封固。
    结果:Negri氏小体红色。
    试剂配制:
    Mann氏染液。
    1%甲基兰水溶液       6ml
    1%伊红水溶液         6ml
    蒸馏水               28ml
     
    2、Nacchiavello氏染色
    (1)切片脱蜡至水。
    (2)以0.25%碱性品红水溶液染色30分钟。
    (3)用0.5%柠檬酸分化约3秒钟。
    (4)自来水洗。
    (5)用1%亚甲兰作对比染色15-30分钟。
    (6)水洗。
    (7)脱水、透明、封固。
    结果:包涵体、立克次氏体均染红色,其余组织呈蓝色。

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