五、铬酸P、A、S(真菌类染色)
⑴石蜡切片2-3微米,脱腊常规至水。
⑵4%铬酸氧化1小时。
⑶流水冲洗5分钟,蒸馏水洗2分钟。
⑷冷雪夫氏(Cold Sohiff)液,15-20分钟。
⑸0.5%偏重亚硫酸钠水溶液5分钟(更换2次)。
⑹水洗5分钟。
⑺蒸馏水洗,至70%酒精洗2分钟。
⑻醛复红染液30分钟。
⑼95%酒精洗(洗去多余染料)。
⑽蒸馏水洗,入淡绿染液30秒钟。
⑾蒸馏水速洗(镜下观察)。
⑿曲霉菌、念球菌属、细胞浆菌属、隐球菌属为红紫色。曲霉菌丝周边紫红色,弹力纤维紫色,背景绿色。
六、病毒包涵体染色法
1、Mann氏甲基蓝伊红染色法
Mann氏甲基蓝伊红染色法,是一种病毒包涵体的染色法,在HE染色切片上包涵体就能显示出来,用这一染色法则更清楚。
操作方法:
(1)切片脱蜡至水。
(2)用Mann氏染液染色8-24小时(染液要新配制)。
(3)蒸馏水洗。
(4)用碱性酒精分化(40%氢氧化钠2-3滴,无水酒精100ml)约30秒钟。
(5)两酮速脱水。
(6)二甲苯透明、封固。
结果:Negri氏小体红色。
试剂配制:
Mann氏染液。
1%甲基兰水溶液 6ml
1%伊红水溶液 6ml
蒸馏水 28ml
2、Nacchiavello氏染色
(1)切片脱蜡至水。
(2)以0.25%碱性品红水溶液染色30分钟。
(3)用0.5%柠檬酸分化约3秒钟。
(4)自来水洗。
(5)用1%亚甲兰作对比染色15-30分钟。
(6)水洗。
(7)脱水、透明、封固。
结果:包涵体、立克次氏体均染红色,其余组织呈蓝色。


