生物秀首页 新闻前沿 产业资讯 实验技术 仪器教程 生物考研 资源下载 生物人 物秀商城 生物论坛 图片 专业 博客 易生物 视频动画
生命科学实验中心
导航: 生物秀 > 实验 > 实验基础 > 基本技术 > 正文
  • 倾力提供最优!
  • 生物秀实验频道
结缔组织染色法
作者:未知 来源:生物秀 时间:2006-10-18

     
    三、弹力纤维染色法
    弹力纤维较细,直径0.2-1微米,且坚固,弹性大,容易伸展,纤维分枝连接成网,没有原纤维,量少时不易与胶原纤维区分,量多时才可识别。HE染色与胶原纤维着色相似,若用弹力纤维染色法,则可分辨的很清楚。例如,观察血管弹力层的异常。
    弹力纤维具强嗜酸性,用升汞,酒精固定染色较佳,适于福尔马林固定。
    操作方法:
    1.       Weigert氏弹力纤维染色法:
    (1)标本用Zenker氏液,酒精或10%甲醛固定均可。
    (2)石蜡或冰冻切片。
    (3)染色前的程序,按照常规进行。
    (4) 水洗后,入Weigert氏染色液2-6小时或更长的时间,一般依染色液的新旧而定 。
    (5)切片从染液中取出,直接浸入1%盐酸酒精或酒精中进行分化。
    (6)如需复染细胞核,可染于明矾苏木素溶液中10分钟。
    (7)冲洗后,可再以Ven Gieson氏染液作对比染色1-2分钟。
    (8)95%酒精分化、脱水、透明、封固。
    结果:弹力纤维呈暗蓝色,细胞核呈蓝色,胶原纤维呈红色,肌纤维呈黄色。
    注意事项:
    Weigert氏弹力纤维染色的配制已有许多改变,盐基性复红(碱性品红)可由其它盐基性染料取代,如甲紫、焦油紫(结晶紫)、维多利亚兰等。配制时如将结晶紫1克加盐基性复红1克,则弹力纤维染成兰绿色;全用甲紫或结晶紫,弹力纤维则呈暗绿色。亦有将染液以酒精加倍稀释,并相应增加盐酸量,之后延长染色时间,染色时间可达数小时甚至过夜,对纤细的弹力纤维显示更好。
    试剂配制:
    盐基性复红(碱性品红)                     1g
    间苯二酚(雷锁辛)                         4-5g
    蒸馏水                                     200ml
    29%三氯化铁水溶液                          25ml 
    95%酒精                                    200ml
        浓盐酸                                     4ml
    先将盐基性复红(碱性品红)溶于200ml的蒸馏水中,加入4-5g间苯二酚,加温煮沸(不停搅拌),然后加入25ml的29%三氯化铁水溶液,继续搅拌煮沸2-5分钟,冷却后过滤倾去滤液,将滤纸及沉淀物置于温箱中烘干。而后将滤纸和干燥的沉淀物一并投入烧杯,加200ml95%酒精,小心隔水加热,徐徐搅拌使沉淀溶解,然后弃去滤纸冷却后,补足因加热蒸发的酒精。最后加入4ml的盐酸即可应用。(对苯二酚可代替间苯二酚)。
    2.     Verhoeff氏弹力纤维染色法:
    操作方法:
    (1)切片常规脱蜡。
    (2)Verhoeff染液15-60分钟。
    (3)以2%三氯化铁分化(镜下控制)。
    (4)水洗再以95%酒精洗去碘。
    (5)流水洗。
    (6)以苏木素-伊红或Ven Geison氏染液复染。
    (7) 脱水、透明、封固。
    结果:弹力纤维蓝黑色,其它组织视复染而定。
    注意事项:这种染色法染液配制简单,但对微细弹力纤维不如Weigert氏效果好。
    试剂配制:
    将1克苏木素加热溶于20ml的无水酒精,冷却后,加1%三氯化铁水溶液8ml搅拌;再加入 8ml的Lugoi碘液(碘1克,碘化钾2克,蒸馏水100ml)搅拌混合而成。染液仅可存放2-3周。

    上一页  [1] [2] [3] 

关于〖结缔组织染色法〗的最新评论
昵称:      评分: 1分 2分 3分 4分 5分
内容:
生物秀实验频道
设为首页 | 加入收藏 | 关于我们 | 战略伙伴 | 友情链接 | 法律声明 | 广告服务 | 联系我们 | 网站地图
Copyright © 2003-2008 生物秀 (中国·生物秀科技) 版权所有 信产部备案:鲁ICP备05001831号
客服信箱:info@bbioo.com  客服电话:15800302289  客服QQ:254857951
www.bbioo.com All Rights Reserved.