4.二氧乙环(Dioxan)：二氧乙环是一种有毒物质,易挥发(使用场所必须通风),能同水、酒精、二甲苯相混合并能溶解石蜡,是一种既可以脱水,也具有透明效果的液体。脱水一般可以70%开始,再经过90%至纯二氧乙环,然后浸入石蜡。二氧乙环脱水对组织无收缩和硬化等不良现象,对较硬的组织或易收缩的组织可使用二氧乙环。
二.组织的摇震
为加快脱水进程可将标本放入各级酒精内借助机器或手工震摇，还可以加温促进脱水。即将标本装在塞紧的玻璃瓶置于包埋箱或温箱内，因液体受热产生的正压可增加溶液的对流。但热酒精会使组织过硬，并有爆裂危险，除急诊外，最好不用此方法。
第二节 透 明
组织脱水后，还要经过一个浸蜡的媒剂透明过程。目的是使石蜡渗透到组织中去，达到包埋的支持作用。常用的脱水剂如酒精等，不能溶解石蜡与之相混合，因此必须使用一种既可以同酒精又能同石蜡相混合的媒剂，当组织脱水后，浸蜡之前将组织投入这种媒剂中。由于两剂能相混合，另一方面也由于这种媒剂比酒精比重大，组织中的酒精就被该媒剂取代，待酒精完全被该媒剂完全取代后，组织即成透明状态，因此我们长称这种媒剂为透明剂，在制片中的这一过程就称为透明过程。实质上透明仅是一种过程而非目的，其所以出现透明现象使因其折光系数改变的缘故。从组织的状态上看，由于组织经过媒剂的作用之后，其折射系数近于组织蛋白的折射系数，从而显示出透明状态。组织一旦呈现透明状态，也说明脱水剂已被媒剂所取代。透明后就可以将组织浸入溶解的石蜡进行浸蜡。
透明剂
透明剂很多，一般常用的有二甲苯，苯，甲苯，氯仿，香柏油等。
1．二甲苯：是最为常用的一种透明剂，它能与酒精，丙酮相混合，又是石蜡的溶剂。在透明过程中，组织继续发生硬化，由于二甲苯对组织的收缩性强，作用迅速，因此，组织在二甲苯中时间不宜过长，否则组织容易变脆变硬，一般是达到组织的透明为度，小块组织在半至一小时内透明。为了不使组织过度硬化，苯则。是更好的一种透明剂，它较甲苯和二甲苯的作用稍缓，对组织收缩较少，不易变脆。但苯较二甲苯毒性大，挥发快，故应注意安全使用。
2．氯仿：也是一种很好的媒剂，它的作用缓和。组织在此液内过夜也不至于过硬变脆，这一点较苯，二甲苯和甲苯优良。但氯仿比重较大，折光率较小，不能改变组织的折光率，组织在氯仿中不易呈现二甲苯那样的透明现象，所以组织要比实际需要浸渍更长一些时间保证完全渗透和置换出酒精。
3．香柏油：是研究处理细柔组织的最佳透明剂，因它的硬化作用极小，组织在此液体内较长时间甚至几个月也可无妨。过硬的组织脱水后，（如皮肤和致密纤维组织）用香柏油透明，经此处理后的组织容易切片。不过香柏油的浓度大，渗透力弱，同石蜡混合不及其他透明剂效果好，故常规石蜡切片一般不用。
透明时间的长短因组织的大小而异。例如脑组织和有血块的组织，就应该缩短在二甲苯内留置时间，而一些肌肉组织和胃肠组织则应该稍延长在二甲苯内留置时间，最好先投入酒精和透明剂等量混合液半小时，再入透明剂，并更换一次透明剂，待组织完全透明后进行浸蜡，一般需要半小时至2－－3小时。
脂肪组织由于其结构不同透明最快，但是这并不能说明组织中脱水剂已完全被透明剂取代，因脂肪组织本身折光率与透明剂（二甲苯）相近，所以应在透明剂中多浸一段时间使脂肪组织尽可能为透明剂所溶解，才有利于石蜡的侵入。
透明过久是否会导致组织过度硬化变脆，这取决于脱水的彻底与否，如果组织脱水完全彻底，则不会导致过度硬化和变脆，个别含胶样物质过多的组织例外。
第三节 浸 蜡
组织经媒剂的透明作用之后，移入熔化的石蜡内浸渍，石蜡逐渐浸入组织间隙，取代透明剂，这一程序就叫浸蜡。根据所用石蜡的熔点，浸蜡需要能够保持于54－60.C温箱内进行。石蜡的质量和熔度与切片质量密切相关，因此对石蜡的选择应以注意。
用作浸蜡的石蜡不应含有尘粒，杂质及其他异物，不含水分，质地均匀成半透明状，触之感觉滑而不腻，结晶及颗粒少。石蜡中如有水分会结晶而变为白斑可用加热搅拌的方法除去。所有的蜡在使用前按常规必须用标准滤纸在漏斗内过滤到搪瓷杯里储存于浸蜡箱中。最好将石蜡于小锅中加热煮至近沸，冷却再煮反复数次后空气可以排除，挥发性油脂类在煮的过程中挥发。处置后的石蜡置于恒温箱中保持液体状态备用。所用的石蜡有一定的熔点和硬度，熔点高，硬度大。一般要求在52－56℃之间，这既可以支持硬组织也可使切片成条。使用时应根据组织类型以及制片时的温度和气候而异。夏季采用高熔点的石蜡，冬季则采用低熔点的石蜡。
石蜡的熔点越低，其质地相应的较为疏松。硬蜡（熔点60℃）用于硬纤维组织。软蜡用于胎儿和乳腺组织，这些尽为研究工作的需要。为了增加石蜡的韧性，可在石蜡中加入一些混合剂，常用蜂蜡，硬脂酸，松香等。
