（一）材料及试剂                
1．猪瘟单抗纯化抗原
2．兔抗猪IgG酶标抗体
3．猪瘟阳性血清
4．猪瘟阴性血清
1～4均由指定的生物制品所购买。
5．ELISA反应板
6．包被液
碳酸钠                               1.50g
碳酸氢钠                             2.93g
H₂O加至                            1 000ml
pH值9.6
7．PBS液
氯化钠                               8.90g
磷酸二氢钾                           0.20g
无水磷酸氢二钠                       2.13g
加双馏水                             1 000ml
8．PBS－吐温洗涤液
PBS液                               1 000ml
犊牛血清                                5ml
混合即可
9．底物溶液
⑴ 0.1Mol/L柠檬酸液
柠檬酸                                 21g
双蒸馏水加至                        1 000ml
⑵ 0.2Mol/L Na₂HPO₄液
Na₂HPO₄·12H₂O                      71.6g
双蒸馏水   加至                     1 000ml
⑶ pH5.0磷酸盐－柠檬酸缓冲液
取⑴液                              24.30ml
⑵液                              25.70ml
混匀即可
⑷邻苯二胺液
取⑶液                              50ml
双馏水                              50ml
磷苯二胺                            20mg
30%H₂O₂                           0.15ml
待邻苯二胺溶化后再加H₂O₂，现用现配。
10．终止液
浓H₂SO₄(98%)                       22.2ml
H₂O                               177.80ml
（二）操作方法
1．用包被液将猪瘟弱毒单抗纯化酶联抗原、猪瘟强毒单抗纯化酶联抗原各做100倍稀释，每孔包被100µl，4℃湿盒过夜。
2．次日取出，甩去孔内液体，3×3′冲洗。
3．将待检血清以PBS液做400倍稀释，每孔加100µl同时将猪瘟阳性血清、猪瘟阴性血清各做100倍稀释，于对照孔中加100μl。37℃温育1.5h～2h。
4．重复第二步，取出，甩去孔内液体，3×3′洗涤。
5．将兔抗猪IgG酶标抗体以PBS液做100倍稀释，每孔加100μl，37℃温育1.5h～2h。
6．重复第4步。
7．每孔加底物溶液100µl，室温下观察显色反应。当阴性对照孔稍显色时，立即终止反应，并以阴性孔做空白对照。
8．每孔加终止液50µl立即于酶联免疫吸附检测仪测定490nm波长的光密度。
（三）结果判定
在猪瘟弱毒酶联板上，OD≥0.2，为猪瘟弱毒抗体阳性；OD＜0.2，为猪瘟弱毒抗体阴性。
在猪瘟强毒酶联板上，OD≥0.5，为猪瘟强毒抗体阳性；OD＜0.2，为猪瘟强毒抗体阴性。