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微量补体结合反应(以钩端螺旋体病为例)
作者:未知 来源:生物秀 时间:2006-10-15
    本试验采取热法血清稀释法。每滴相当于0.02ml,总量为6滴,相当于0.12ml。
    1.抗原  系各型菌株培养物多价抗原,按瓶签说明倍数稀释。
    2.溶血素  正式试验时使用2个工作单位。
    3.补体系冻干补体  用灭菌生理盐水作1︰5基础稀释。在溶血素效价测定和补体效价滴定时均作1︰60稀释,在正式试验时,用2个工作单位。
    4.1%的红血球悬液,用灭菌生理盐水洗涤与配制。在使用时与等量含2个工作单位的溶血素液配成致敏红血球悬液。
    5.阳性血清  正式试验时1︰100稀释。
    6.阴性血清  正式试验时1︰10稀释。
    7.生理盐水
    (二)预实验
    1.溶血素效价测定  用小试管做时,单位为ml;用血清稀释板做时,单位为滴。
    ⑴溶血素稀释:先将溶血素做1︰1 000基础稀释。见表6-10。
    表6-10溶血素稀释表(单位:滴)

    ⑵溶血素效价测定  见表6-11。
    表6-11溶血素效价测定表(单位:滴)

    根据上述结果,溶血素效价为1︰5 000即为一个工作单位。2个工作单位溶血素为1︰2 500稀释度。
    2.补体效价测定
    ⑴补体稀释,见表6-12。
    表6-12补体稀释表(单位:ml)

    管号

    1

    2

    3

    4

    5

    6

    7

    8

    9

    10

    11

    12

    1:60补体

    0.05

    0.08

    0.10

    0.12

    0.14

    0.16

    0.05

    0.08

    0.1

    0.12

    0.14

    0.16

    生理盐水

    0.25

    0.22

    0.20

    0.18

    0.16

    0.14

    0.25

    0.22

    0.20

    0.18

    0.16

    0.14

    ⑵补体效价测定,见表6-13。
    表6-13补体效价滴定表(单位:滴)

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