（一）试剂及配制
1．饱和硫酸铵液
2．各种磷酸盐缓冲液
⑴ 0.2mol/L原液

⑶ 0.005Mol/L pH8.0 PB液
 取0.10Mol/L pH8.0 PB液100ml，加H₂O至2 000ml
⑷0.025 Mol/L pH8.0 PB液
 取0.10Mol/L pH8.0 PB液500ml，加水至2 000ml。
⑸ 0.035 Mol/L pH8.0 PB液
 取0.10.1 Mol/L pH8.0 PB液700ml，加水至2 000ml。
⑹ 0.10Mol/L pH5.8PB液
  A：                             920ml
  B：                              80ml
  H2O       加至                 2 000ml
⑺ 0.40Mol/L pH5.2pB液
 a液.0.40Mol/L NaH₂PO₄液
   NaH₂PO₄·2H₂O                    62.40g
   H2O       加至                   1 000ml
 B液.0.40Mol/L Na₂HPO₄液
Na₂HPO₄·12H₂O                   143.4g
H₂O       加至                  1 000ml
         取a液                             960ml
           b液                               40ml 
           混合即可。
    ⑻ 0.01 Mol/L pH8.0PBS液
  取0.10Mol/L pH8.0 PB液             100ml
  NaCl                                8.20g
  H₂O       加至                    1 000ml
3．DEAE-纤维素(细粒级)
4．SephadexG₂₀₀

（二）操作方法
1．取一定量的血清，加等量的生理盐水，然后逐渐滴加饱和硫酸铵溶液，使成40％的饱和度,静置30min。
2．10 000r/min离心10min，去上清。
3．加入一定量的生理盐水，使沉淀溶解，再加入饱和硫酸铵溶液，使成40％饱和度。10 000r/min离心10min，去上清。
    4．再重复步骤3一次。
    5．将沉淀以少量生理盐水溶解，透析，除盐浓缩。
    6．制备DEAE-纤维素柱，以0.005Mol/L pH8.0PB液平衡。
       同时制备SephadexG200凝胶柱，以0.01Mol/L pH8.0PBS液平衡并进行洗脱。
    7．以0.005Mol/L pH8.0PB液洗脱，得蛋白液为IgG。
7．    以0.025 Mol/L pH8.0PB液洗脱，得蛋白主要是IgE，再过SephadexG₂₀₀凝胶柱，收集第一峰即为纯IgE。
8．  以0.035 Mol/L pH8.0PB液洗脱，得蛋白主要是IgA，再过SephadexG₂₀₀凝胶柱，收集第一峰即为纯IgA。
    10．以0.10Mol/L pH5.8PB液洗脱，洗脱液主要有IgM、IgG及白蛋白的混杂物。
11．以0.40Mol/L pH5.2PB液洗脱，得蛋白液主要是IgM。过SephadexG₂₀₀，收
集第二峰即为纯IgM。