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免疫球蛋白提取技术:分泌型IgA的分离与鉴定
作者:未知 来源:生物秀 时间:2006-10-15
    (一)材料与试剂

    1.初乳
    2.SephadexG200
    3.0.10Mol/L pH6.8PB液
    4.0.01Mol/L pH7.4PB液
    5.DEAE52

    (二)操作方法

    1.取初乳20ml,10 000rpm离心10min,弃去表面脂肪层及底部的沉淀物。
    2.取乳清过SephadexG200柱(柱规格为2.50cm×90cm),以0.10Mol/L pH6.8PB液洗脱,第一峰为IgA(含IgG)。
    3.  收集乳液,于0.01Mol/L pH7.4PB液中透析。
    4.  将透析液浓缩至5mg/ml以上。
    5.  过DE52层析柱,用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脱,洗下蛋白峰为IgG,弃去。
    6.  换用0.10Mol/L pH6.8PB液或0.01Mol/L pH7.4PBS(0.10Mol/L NaCl)液洗脱,
    收集洗脱液 ,即为较纯的IgA液。
    7.  必要时,可再过一次SephadexG200柱。
    8.  浓缩,鉴定
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