骨肿瘤较罕见，恶性骨肿瘤只占全身恶性肿瘤的1%，男多于女，性别比约为1.6 ∶1，均好发于10-30岁间，良性者以骨软骨瘤最多，依次为骨巨细胞瘤、内生软骨瘤 等，恶性者以骨肉瘤最多，依次为软骨肉瘤、纤维肉瘤等.骨恶性肿瘤的发生机理目 前认为是癌基因显性作用与抗癌基因失活的结果，是多种癌基因多阶段多途径协同作 用的结果.骨恶性肿瘤转移涉及到肿瘤细胞自身与宿主细胞之间错综复杂的关系，受 多种相关基因的调控，即肿瘤的转移与转移基因和转移抑制基因有关，与生长因子及 其受体的表达以及某些癌基因产物有关.因此，通过对活化的癌基因及抗癌基因改变 的检测，可以快速分析患者肿瘤的易感性及判断肿瘤的预后;检测耐药基因的表达程 度，可为肿瘤的诊治提供方案选择的依据;通过对转移基因及转移抑制基因的检测， 可以判断肿瘤有无转移，对手术治疗案提供依据.

　　PCR技术是一门新型快速诊断技术，具有敏感、特异、专一性强等特点，在骨肿 瘤诊断及研究方面具有其它方法难以比拟的优越性.

一、PCR技术在骨肿瘤诊断中的应用

　　骨肿瘤诊断需要解剖学、组织学和胚胎学等基础知识，对病变需认真观察，仔细 分析，但更重要的是对临床资料及X线所见要特别重视.骨肿瘤形态变异较大，而临床 X线观察较全面，病理镜检有一定局限性，而一些癌基因改变是与某一型骨肿瘤密切 相关，即为肿瘤特异性基因，因此在骨肿瘤诊断方面在坚持临床、X线及病理三结合 的诊断原则基础上，通过PCR技术对肿瘤特异性癌基因变化的检测，可以更好地辅助 骨肿瘤的诊断，具有其它方法不可代替的优越性.

1.成骨系统肿瘤的诊断

　　本系统中恶性肿瘤最多见的是骨肉瘤，由于骨肉瘤类型繁多，有多方向分化特 点，故形态复杂，除常见的成骨型、成软骨型、成纤维型外，尚有较罕见的恶纤维 型、血管扩张型、小圆细胞型，髓内高分化型和富于巨细型的骨肉瘤.骨肉瘤虽多由 髓内发生，但也可由骨外膜发生，向外生长形成骨表面骨肉瘤.骨表面骨肉瘤近年来 又根据其形态及恶性度的不同分成四个亚型，尽管各型有其形态特征，但在常规诊断 时还是有不少被误诊.肿瘤生物学研究表明，骨肉瘤中细胞DNA含量明显高于正常细 胞，并具有一系列癌基因的改变，如骨肉瘤中75%的P53基因突变，mdm2、c-myc及 c-raf扩增，TPR-met重排等.

　　首先，我们可以用定量PCR方法检测细胞中DNA含量，来判断肿瘤的良恶性，接 着，利用多重PCR或巢式PCR检测P53、mdm2、c-raf、met等的基因改变，来确诊是否 为骨肉瘤，同样可以利用数种骨肉瘤特异的单克隆抗体，采用免疫PCR方法对骨肉瘤 进行诊断及分型.随着nm生物学技术的发展，可以利用原位PCR方法，先确定好特异性 癌基因产物的位置，然后在透射电镱下动态观察其形态及结构，这样可以更好地确诊.

2.软骨系统肿瘤的诊断

　　软骨肿瘤的恶性程度除与细胞异形性有关外，和肿瘤发生部位及其体积大小亦密 切相关.发生在近心端的如骨盆、肩胛等直径大于6cm者，即使细胞异形性不太明显， 也可能为高分化软骨肉瘤，反之若肿瘤发生在远端，虽细胞较密集有中等程度异形 性，但一般显示良性生物学行为，可诊断为良性肿瘤.软骨肿瘤分类也十分复杂，根 据形态学诊断易误诊，从基因水平来诊断更符合实际情况.首先要区分是良性肿瘤还 是恶性肿瘤，运用定量PCR方法，检测细胞中DNA含量，可以判断良恶性.其次，要与 骨及其它组织肿瘤相鉴别.研究表明，Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、骨形成蛋白、骨钙素、 骨连接蛋白等均为骨特异性蛋白，运用定量PCR方法，检测相应基因的表达程度可以 确定其组织来源，同样也可以利用相应的单克隆抗体，采用免疫PCR方法确定其组织 来源及分型.

3.骨恶性肿瘤转移的诊断

　　近几年的研究表明，癌基因mdm2的扩增与骨恶性肿瘤的转移密切相关，mn23-H1 在转移的骨恶性肿瘤中呈低表达，在分化良好的肿瘤中呈高表达.因此，运用定量PCR 方法检测癌基因mdm2扩增程度，以及mn23-H1的表达程度可以判断骨恶性肿瘤有无转 移.

4.骨恶性肿瘤治疗效果的判断

　　近几年的研究表明，微小转移灶在骨恶性肿瘤发生后不久就存在于周围的血液循 环中，骨肿瘤的手术治疗只能解决局部问题，而微小转移灶的清除必须依赖于放疗、 化疗或免疫治疗，因此，检测外周血中有无微小残余病灶，可以判断治疗效果，并对 是否需要继续治疗提供依据.

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