一、目的要求
了解抗生素发酵的基本过程。
了解管碟法测定抗生素生物效价的基本原理。
学会管碟法测定抗生素效价方法，并学习抗生素发酵过程一些重要生理生化指标分析。
二、基本原理
多粘菌素E 是由多粘芽孢杆菌产生的一种碱性多肽类抗生素，由10 个氨基酸和1 个脂肪酸衍生物构成。结构如图5-1。多粘菌素E 主要对绿脓杆菌、百日咳杆菌、大肠杆菌等革兰氏阴性细菌有显著的杀菌作用(是作用于细胞膜的抗生素)。是治疗烫伤、肠道疾病、呼吸道疾病、尿路感染、眼部感染及外科手术感染时较好的药物。
图5-1 多粘菌素E 的结构式
抗生素液体发酵共分三大工序：菌种、发酵、提炼。配合三个工序进行分析化验和有关产物测定。
(一) 菌种
种子质量指标：无杂菌，全部形成芽孢，摇瓶发酵效价达35 000 u/mL 以上（30℃，48 h 培养，方可用于生产。
（二） 发酵
抗生素发酵过程除需经常镜检排除杂菌污染外，接种12 h 后，每2 h 进行一次pH、生物量、总糖、还原糖、氨基氮测定。多粘菌素E 发酵一级种子同时需检测2，3-丁二醇，发酵需检测糊精和抗生素效价。
一级种子质量指标：无杂菌，全部杆菌，粗壮整齐，无噬菌体；pH 5.5~6.0；刚刚出现2,3-丁二醇。二级发酵质量指标：菌体粗壮整齐，无噬菌体和杂菌感染；pH 6.0；糊精刚刚消失；多粘菌素E效价10000~35000 u/mL。
(三) 提炼
衡量抗生素发酵液中抗菌物质的含量称效价。抗生素效价测定可采用化学法或生物效价测定法。
