无论是采用哪种操作方式,最终都要分别收集处在每一区带的样品组分,一般可采用下述两种方法实现:
(1)穿刺法
这是方便而又理想的部分收集方法。用一根金属空心针从离心管底刺人管内,不同区带内的组分自下而上地先后从针管内分别流出,然后用部分收集器分别收集。
(2)取代法
在离心管口加一个带有收集导管的塞子,塞子上同时装有一根输液导管插入离心管的管底,从输液管中注入高密度的离心介质.其密度高于离心管中所形成的最大密度。当取代液不断注入时离心管中的溶液逐渐上升,并不断从收集导管中流出,然后用部分收集器分别收集。
离心机类型
通常所使用的离心机根据转子转速大小的不同可分为普通离心机、高速离心机和超速离心机三类。
(1)普通离心机
一般来说,最大转速不超过6000r/min 者属普通离心机;如国产的80—1型,LXJ—Ⅱ型等。离心机转速与相对离心力的测算,如图2—37。
普通离心机转子在室温下运转,转子室内的温度一般无法控制,转子有固定角度式和悬挂吊格式。
离心时形成的固体沉淀层叫压板,液相部分称之为上层清液。用倾注法分离两相。
(2)高速离心机
转速可以达到25000r/min 者为高速离心机;转速在25000r/min 以上者为超速离心机。高速离心机一般带有制冷装置,因而转子室内的温度可以控制。转子室内的温度一般控制在4℃为宜。。其中大容量连续流动离心机的主要用途是从大量培养物(5~500 L)中收集酵母及细菌等。另一类是低容量冰冻离心机,型号甚多,其最大容量可达3L。这类离心机有各种内部可变换的角式和甩平式转头,它们多用于收集微生物、细胞碎片、细胞、大的细胞器、硫酸铵沉淀物、免疫沉淀物酶的粗提液等。特别需注意的是,每次离心前,应根据转头型号和样品多少,设置样品高度。
图2—37 离心机转速与相对离心力的测算图


