柱效的测定和计算：
以反相柱为例，流动相用87％(V/V)的甲醇:水，样品用苯、联苯、萘等，加快记录仪的走纸速度，
测出半峰宽W1/2，并由走纸速度换算为与tR 相同的单位”分”或”秒”，代入公式，计算出柱效N。
提高柱效的方法：
①固定相填料要均一，颗粒细，装填均匀；②流动相粘度低；③低流速；④升高柱温。
(3)不对称因子”Tf”
用于形容色谱峰拖尾和前伸的程度，多数为拖尾峰。
图2—31 拖尾及前伸峰示意图
A、B 如上图所示
通常 Tf＝1.2～1.3 ，若 Tf＞2 则峰不合格。
峰拖尾的原因是硅胶基质上的Si－OH 羟基未被全部键合而与溶质发生反应。
改进拖尾要用封尾技术：即用小分子的含甲基的物质再次对硅胶进行键合，封闭硅羟基；还可在流动相中加入带 –NH2氨基(对羟基敏感)的物质，将残余的羟基掩闭。
分辨率：
(4)分离度 K1和 K3
HPLC 的目的和要求是：峰要尽可能窄(W1/2小)，峰的间距尽可能大(tR 相差大)。
⑴基线分离度 K1 ：
基线分离时用K1。
⑵峰高分离度：
图2—33 未分离峰示意图
当K3＝1时 ，基线分离，K3 更反映了实际分离心程度。
(5)线速度：溶剂在柱中移动的速度。
L─柱长 t0 ─死时间
此处不用流量而用线速度，是因为流量与柱径有关，而线速度与柱径无关。
表2—8 不同柱内径的最佳流量
