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具体层析方法:气相色谱层析
作者:未知 来源:郑州轻工业学院 时间:2006-9-24

    基本原理
    混合样品的气流通过固定相时,根据各组分对固定相的吸附强弱不同使不同成分得到分离。气相色谱仪的基本流程,如图2-26。

    气相色谱仪的基本部件
    (1)载气 常用的载气主要有氮、氩、氢和二氧化碳等。这些气体一般都由高压气瓶供给
    (2)进样器 气相色谱仪可以用于分离固相、气相和液相标本。液相标本采用微升注射器穿过橡皮隔片注入,气相标本采用特种气相注射器注入。
    (3)谱柱及加热炉 色谱柱一般由金属或玻璃制成,通常采用的柱长2m~4m,内径2mm,毛细管柱长度可达20m~150m,内径为0.2mm。
    载体一般采用惰性、多孔的固体颗粒。多由硅藻土或玻璃珠制成,分析不同极性的微生物化合物,为了获得最适的分离条件,要求有不同固定相的载体。目前比较常用的载体有:聚乙二醇(CarbOwax 20M)、F F A P(聚乙二醇20M 和2-硝基对苯二甲酸的反应产物),OV-17(苯基甲基硅酮)。OV-210、SE-30(甲基硅酮)、Chromosorb G(白色硅藻土载体)等。柱加热炉在温度控制上是非常重要。
    (4)纪录仪
    (5)数据处理装置 一般均附有数据处理计算机。

    试验条件的选择
    (1)柱的选择 要注意极性及最高使用温度,柱温不能超过最高使用温度。固定相按极性相似的原则选择。
    色谱柱的内径大小、长度都能影响分离率。一般而言,内径越小,长度越长,分离效果越好,一般柱长为1m~5m(毛细管柱则20m~100m)。
    填充剂颗粒一般采用40目~60目,60目~80目及80目~100目大小。长柱子宜用粒度大些的,以减少柱压降,短柱子则用粒度细的。
    气相色谱中固定液的含量对分离效率的影响较大。一般采用固定液与载体重量之比为15︰100~25︰100。采用高灵敏度的检测器,由于进样量减少,固定液含量可以降至5︰100以下。这样可以使用较低柱温,从而提高柱效,缩短分析时间。但固定液用量太少会引起吸附。
    (2)柱温选择 柱温选择对分离度影响很大,常是条件选择的关键。选择的基本原则是:在使最难分离的组分有尽可能好的分离高度的前提下,尽可能采取较低温度,但以保留时间适宜及不拖尾为度。
    ①高沸点混合物(200℃~400℃),若需在较低的柱温下分析,可采用低固定液配比1%~3%,采用高灵敏检测器,柱温可比沸点低100℃~150℃,在200℃~250℃的柱温下分析。

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