一、实验目的
1.了解过氧化氢酶的作用，掌握常用的测定过氧化氢酶的方法。
2.了解过氧化物酶的作用，掌握常用的测定过氧化物酶的方法。

二、实验原理
氧化物酶是植物体内普通存在的、活性较高的一种酶。它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系，在植物生长发育过程中，它的活性不断发生变化，因此测量这种酶，可以反映某一时期植物体内代谢的变化在过氧化物酶催化下，H₂O₂将愈创木酚氧化成茶褐色产物。此产物在470nm 处有最大光吸收，故可通过测470nm 下的吸光度变化测定过氧化物酶的活性(愈创木酚法)。
过氧化氢酶普遍存在于植物的所有组织中，其活性与植物的代谢强度及抗寒、抗病能力有一定关系。过氧化氢酶属于血红蛋白酶，含有铁，它能催化过氧化氢分解为水和分子氧，在此过程中起传递电子的作用，过氧化氢则既是氧化剂又是还原剂。

因此，可根据H₂O₂的消耗量或02的生成量测定该酶活力大小。
在反应系统中加入一定量(反应过量)的过氧化氢溶液，经酶促反应后，用标准高锰酸钾溶液(在酸性条件下)滴定多余的过氧化氢，即可求出消耗的H₂O₂的量。

三、仪器、原料和试剂
(一) 测定过氧化氢酶
仪器722型分光光度计，离心机，研钵，容量瓶，试管，吸管
原料
马铃薯块茎。
试剂
1. 0.05mol/LpH 5.5的磷酸缓冲液；
2. 0.05mol/L 愈创木酚溶液；
3. 2％H₂O₂；
4. 20％三氯乙酸。
（二）过氧化物酶活性的测定
仪器
研钵，三角瓶，酸式滴定管，恒温水浴锅，容量瓶；
原料
小麦叶片
试剂
1. 10％H₂SO₄
2. 0.2mol/LpH7.8磷酸缓冲液
3. 0.1mol/L 高锰酸钾标准液：称取KMnO₄3.1605g，用新煮沸冷却蒸馏水配制成1000mL，再用0.1mol/L 草酸溶液标定。
4. 0.1mol/LH₂O₂： 市售30％H202大约等于17.6mol/L，取30％H₂O₂溶掖5.68mL，稀释至l000mL，用标准0.1mol/LKMnO₄溶液(在酸性条件下)进行标定。
5. 0.1mol/L 草酸：称取优级纯H₂C₂O₄·2K₂O12.607g 用蒸馏水溶解后，定容至1000mL。

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