4.浓缩
将乙醚提取液经过无水硫酸钠(约5g)滤入250～300mL 旋转蒸发瓶内，用约50 mL 乙醚冲洗分液漏斗及无水硫酸钠3次，并入蒸发瓶内，并将其接至旋转蒸发器上，于55℃水浴中减压蒸馏并回收乙醚，待瓶中剩下约2mL 乙醚时，取下蒸发瓶，立即用氮气吹掉乙醚。加入2.00 mL 乙醇，充分混合，溶解提取物。
5.离心
将乙醇液移入小塑料离心管中，3000rpm 离心5min。上清液供色谱分析。如果样品中维生素含量过少，可用氮气将乙醇液吹干后，再用乙醇重新定容，并记下体积比。
(二)标准曲线的制备
1. 维生素A 和维生素E 标准浓度的标定方法
取维生素A 和各维生素E 标准液若干微升，分别稀释至5.00 mL 乙醇中，并分别按给定波长测定各维生素的吸光值。用比吸光系数计算出该维生素的浓度。
测定条件如下表所示
X—某维生素浓度，mg/mL；
A— 维生素的平均紫外吸光值；
S— 加入标准的量，μL，
E— 某种维生素1%比吸光系数；
5.00/S×10-3 — 标准液稀释倍数。
2. 标准曲线的制备
本方法采用内标法定量。将一定量的维生素A、α-生育酚、β-生育酚、δ-生育酚及内标苯并[e]芘液混合均匀；选择合适灵敏度，使上述物质的各峰高约为满量程70%，为高浓度点。高浓度的1/2为低浓度点(其内标苯并［e］芘的浓度值不变)．用此种浓度的混合标准进行色谱分析。维生素标准曲线绘制是以维生素峰面积与内标物峰面积之比为纵坐标，维生素浓度为横坐标绘制，或计算直线回归方程。如有微处理机装置，则按仪器说明用二点内标法进行定量。
本方法不能将β-E 和γ-E 分开，故γ-E 峰中包含有β-E 峰。
(三)高效液相色谱分析
1.色谱条件(推荐条件)
预柱：ultrasphere ODS 10μm，4mm×4.5cm；
分析柱：ultrasphere ODS 5μm，4.6mm×25cm ；
流动相：甲醇：水=98：2；混匀，于临用前脱气；
紫外硷测器波长：300nm；量程0.02；
进样量：20μL 进样定量环；
流速： 1.65~1.70mL/min
2.样品分析
取样品浓缩液20μL，待绘制出色谱图及色谱参数后，再进行定性和定量。
定性：用标准物色谱峰的保留时间定性。
定量：根据色谱图求出某种维生素峰面积与内标物峰面积的比值，以此值在标准曲线上查到其含量。或用回归方程求出其含量。
五、计算
X=C/m×V×100/1000
X—某种维生素的含量(mg/100g)；
C—由标准曲线上查到某种维生素含量(μg/mL)；
V—样品浓缩定容体积(mL)；
m：样品质量(g)。
用微处理机二点内标法进行计算时．按其计算公式计算或由微机直接给出结果。结果的允许测定结果相对偏差绝对值≤10%
