生物秀首页 新闻前沿 产业资讯 实验技术 仪器教程 生物考研 资源下载 生物人 物秀商城 生物论坛 图片 专业 博客 易生物 视频动画
生命科学实验中心
导航: 生物秀 > 实验 > 电泳技术 > 电泳基础知识 > 正文
  • 倾力提供最优!
  • 生物秀实验频道
电泳技术详述(发展史、原理、分类等)
作者:未知 来源:郑州轻工业学院 时间:2006-9-22

    (4)电渗
    液体在电场中,对于固体支持介质的相对移动,称为电渗现象。由于支持介质表面可能会存在一些带电基团,如滤纸表面通常有一些羧基,琼脂可能会含有一些硫酸基,而玻璃表面通常有Si-OH 基团等等。这些基团电离后会使支持介质表面带电,吸附一些带相反电荷的离子,在电场的作用下向电极方向移动,形成介质表面溶液的流动,这种现象就是电渗。在pH 值高于3时,玻璃表面带负电,吸附溶液中的正电离子,引起玻璃表面附近溶液层带正电,在电场的作用下,向负极迁移,带动电极液
    产生向负极的电渗流。如果电渗方向与待分离分子电泳方向相同,则加快电泳速度;如果相反,则降低电泳速度。
    (5)支持介质的筛孔
    支持介质的筛孔大小对待分离生物大分子的电泳迁移速度有明显的影响。在筛孔大的介质中泳动速度快,反之,则泳动速度慢。
    电泳的分类
    ⑴电泳按其分离原理的不同,分为区带电泳、 移动界面电泳、等速电泳、等电聚焦电泳等,如图2—15。
    ①区带电泳:电泳过程中,待分离的各组分分子在支持介质中被分离成许多条明显的区带,这是当前应用最为广泛的电泳技术。
    ②自由界面电泳: 这是瑞典Uppsala 大学的著名科学家Tiselius 最早建立的电泳技术,是在U形管中进行电泳,无支持介质,因而分离效果差,现已被其他电泳技术所取代。
    ③等速电泳:需使用专用电泳仪,当电泳达到平衡后,各电泳区带相随,分成清晰的界面,并以等速向前运动。
    ④等电聚焦电泳:由两性电解质在电场中自动形成pH 梯度,当被分离的生物大分子移动到各自等电点的pH 处聚集成很窄的区带。

    a. 区带电泳 b. 移动界面电泳 c. 等速电泳 d. 等电聚焦电泳
    ⑵电泳按支持介质的不同,分为纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、琼脂凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等。
    ⑶电泳按支持介质形状的不同,分为薄层电泳、板电泳、柱电泳等。
    ⑷按用途不同可分为分析电泳、制备电泳、定量免疫电泳、连续制备电泳等。
    (5)按所用电压不同可分为:
    ①低压电泳:100V~500V,电泳时间较长,适于分离蛋白质等生物大分子。
    ②高压电泳:1000V~5000V,电泳时间短,有时只需几分钟,多用于氨基酸、多肽、核苷酸和
    糖类等小分子物质的分离。
    纸电泳和醋酸纤维薄膜电泳
    纸电泳是用滤纸作支持介质的一种早期电泳技术。尽管分辨率比凝胶介质要差,但由于其操作简单,所以仍有很多应用,特别是在血清样品的临床检测和病毒分析等方面有重要用途。
    纸电泳使用水平电泳槽。分离氨基酸和核苷酸时常用pH 2.0~3.5的酸性缓冲液,分离蛋白质时常用碱性缓冲液。选用的滤纸必须厚度均匀,常用国产新华滤纸和进口的Whatman 1号滤纸。点样位置是在滤纸的一端距纸边5cm~10cm 处。样品可点成圆形或长条形,长条形的分离效果较好。点样量为5μg~100μg 和5mL~10mL。点样方法有干点法和湿点法。湿点法是在点样前即将滤纸用缓冲液浸湿,样品液要求较浓,不宜多次点样。干点法是在点样后再用缓冲液和喷雾器将滤纸喷湿,点样时可用吹风机吹干后多次点样,因而可以用较稀的样品。电泳时要选择好正、负极,电压通常使用2~10V/cm 的低压电泳,电泳时间较长。对于氨基酸和肽类等小分子物质,则要使用50~200 V/cm 的高压电泳,电泳时间可以大大缩短,但必须解决电泳时的冷却问题,并要注意安全。

    上一页  [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] [10]  ... 下一页  >> 

关于〖电泳技术详述(发展史、原理、分类等)〗的最新评论
昵称:      评分: 1分 2分 3分 4分 5分
内容:
生物秀实验频道
设为首页 | 加入收藏 | 关于我们 | 战略伙伴 | 友情链接 | 法律声明 | 广告服务 | 联系我们 | 网站地图
Copyright © 2003-2008 生物秀 (中国·生物秀科技) 版权所有 信产部备案:鲁ICP备05001831号
客服信箱:info@bbioo.com  客服电话:15800302289  客服QQ:254857951
www.bbioo.com All Rights Reserved.